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【求助/交流】求解蛋白质分离纯化的难题
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609351499
银虫
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[交流]
【求助/交流】求解蛋白质分离纯化的难题
大家好,最近在做蛋白质的分离纯化实验,实验中遇到了一些难题,还请高手指点。
我做真菌产一种酶的分离纯化,但是该菌也产很多多糖,不知用什么办法除去?
对发酵液盐析的蛋白质实验时,经过离心,得到的片状物浮在液面上,管底部液体澄清,没有沉淀,请问这是什么原因,怎么解决?
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2011-03-11 18:15:09
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新艺
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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509518楼
:
Originally posted by
冼亮淀粉酶
at 2011-03-11 21:49:21
发酵液中加入硫酸铵达到一定的饱和度之后,理论上是绝对有蛋白质沉淀下来的,即使没有蛋白质沉淀,那至少发酵液里的菌丝碎片和培养基不溶成分也会沉淀。没有沉淀就说明沉淀跑到液体上层去了。这令我想到一个现象,双 ...
不知道楼主,用没用这个朋友的方法。我以前也遇到过类似楼主的情况,之前是从真菌发酵菌丝体中提取蛋白的,也是加了硫酸铵后发现底部没沉淀,而在上层出现了絮状物续集,但是在上层用分液漏斗收集了之后,后续试验做了发现不是蛋白,当时没找到解决方法,但是对这个现象非常感兴趣,但是时间太紧没有深究。
如果,楼主已经解决了这个问题,还请指教一下给个解惑的方法,谢了!
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22楼
2012-09-09 10:55:30
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~明晓溪~
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609351499(金币
+2
):谢谢参与
我也遇到同样的事情,实际上那些漂浮物可以丢掉了,估计是一些多糖,你不放心的话,跑个电泳看看。我觉的管壁上多少会有些蛋白的,你洗洗看看。
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3楼
2011-03-11 18:35:22
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zhengfan1109
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+2
):谢谢参与
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Originally posted by
609351499
at 2011-03-11 18:15:09:
大家好,最近在做蛋白质的分离纯化实验,实验中遇到了一些难题,还请高手指点。
我做真菌产一种酶的分离纯化,但是该菌也产很多多糖,不知用什么办法除去?
对发酵液盐析的蛋白质实验时,经过离心,得到 ...
走一次凝胶色谱试试,分离到的组分测下糖的含量。
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4楼
2011-03-11 20:46:55
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weishengsu5
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):谢谢参与
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Originally posted by
zyxme
at 2011-03-11 18:33:05:
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5楼
2011-03-11 20:55:07
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