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609351499

银虫 (初入文坛)


[交流] 【求助/交流】求解蛋白质分离纯化的难题

大家好,最近在做蛋白质的分离纯化实验,实验中遇到了一些难题,还请高手指点。
    我做真菌产一种酶的分离纯化,但是该菌也产很多多糖,不知用什么办法除去?
    对发酵液盐析的蛋白质实验时,经过离心,得到的片状物浮在液面上,管底部液体澄清,没有沉淀,请问这是什么原因,怎么解决?Sample Text
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892091690

银虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
509518楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-03-11 21:49:21:
发酵液中加入硫酸铵达到一定的饱和度之后,理论上是绝对有蛋白质沉淀下来的,即使没有蛋白质沉淀,那至少发酵液里的菌丝碎片和培养基不溶成分也会沉淀。没有沉淀就说明沉淀跑到液体上层去了。这令我想到一个现象, ...

我用DNS法测固态发酵所产淀粉酶活性时 参比管中是不加淀粉的粗酶液,测定管是加了淀粉的酶液,测得结果要么负值要么0~0.1之间的数值,可能是什么原因呢?一定要用蒸馏水做参比吗?我看有些文献中还设有对照管 没看懂对照管和测定管有什么不同~~~
19楼2012-03-22 12:52:05
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~明晓溪~

木虫 (正式写手)



609351499(金币+2):谢谢参与
我也遇到同样的事情,实际上那些漂浮物可以丢掉了,估计是一些多糖,你不放心的话,跑个电泳看看。我觉的管壁上多少会有些蛋白的,你洗洗看看。
3楼2011-03-11 18:35:22
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zhengfan1109

银虫 (正式写手)



609351499(金币+2):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by 609351499 at 2011-03-11 18:15:09:
大家好,最近在做蛋白质的分离纯化实验,实验中遇到了一些难题,还请高手指点。
    我做真菌产一种酶的分离纯化,但是该菌也产很多多糖,不知用什么办法除去?
    对发酵液盐析的蛋白质实验时,经过离心,得到 ...

走一次凝胶色谱试试,分离到的组分测下糖的含量。
4楼2011-03-11 20:46:55
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weishengsu5

木虫 (正式写手)



609351499(金币+2):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by zyxme at 2011-03-11 18:33:05:

学习下
5楼2011-03-11 20:55:07
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