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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】请教一个ＤＮＡ退火的问题
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youcai147

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】请教一个ＤＮＡ退火的问题

小弟第一次做ＤＮＡ退火实验，看文献上的具体方法：

94度 to 70度 (2度/5 min), 70度 to 40度 (2度/10 min), 40 度 to
25 度 (2度/5 min). The resulting origami mixture was stable for
several weeks when stored at 4 度.

想请问下这种降温过程用ＰＣＲ仪器如何设置，我理解的是９４度保持５分钟，然后设置９２度保持５分钟，然后一直往下，不知这种理解对没？
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1楼 2011-03-07 15:24:19
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微笑漩涡

新虫 (著名写手)
youcai147(金币+1): 2011-03-07 18:00:59
你的理解是正确的，每5分钟降2度
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2楼2011-03-07 15:49:19
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lcy1971

银虫 (小有名气)
youcai147(金币+1): 2011-03-07 18:01:01
这是降温速度，每5分钟降低2度，到70度后每10分钟降2度。。。。
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3楼2011-03-07 15:50:45
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yixuanwin

铁杆木虫 (正式写手)
youcai147(金币+1): 2011-03-07 18:01:08
你理解是对的。 梯度降温。 一步步设就好了。
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4楼2011-03-07 15:55:42
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lcy1971

银虫 (小有名气)
youcai147(金币+1): 2011-03-07 18:01:12
是变速降温，不是梯度保温。
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5楼2011-03-07 16:00:19
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susizheng

木虫 (著名写手)
youcai147(金币+1): 2011-03-07 18:01:15
94度 to 70度 (2度/5 min), 70度 to 40度 (2度/10 min), 40 度 to
25 度 (2度/5 min).
理解不对吧，既然是退火，应该温度始终降低才对，括号内是降温速度，比如5min降低2度。
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6楼2011-03-07 17:11:16
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cjl2fl

金虫 (正式写手)
youcai147(金币+2): 梯度ＰＣＲ仪　能设置５min降两度？ 2011-03-07 18:02:21
要用梯度PCR仪就能很好的实现。普通的没法。。。
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7楼2011-03-07 17:14:41
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