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【求助/交流】Westen blot问题请教
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lorlarhuan
木虫
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专业: 免疫学研究新技术与新方法
[交流]
【求助/交流】Westen blot问题请教
已有8人参与
请问各位前辈,大家在做westen blot时,跑胶之后转膜,大家都是用什么方法呢?是半干转还是湿转,条件是怎样确定的呢?转完之后是不是根据预染Marker来判断蛋白是否转过去了呢?我在转膜之后的滤纸上有看到比较清晰的预染Marker条带,是否意味着转过了呢?
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1楼
2011-03-07 10:21:43
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ljsh
铁杆木虫
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专业: 免疫学研究新技术与新方法
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转膜条件:250mA 2hours
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5楼
2011-03-07 13:46:40
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阿修罗Axuro
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专业: 药物分析
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最爱花诗雨(金币+2): 鼓励参与交流~~ 2011-03-07 18:35:32
我们一般是电转的,恩,转膜以后看Marker膜上有的话 就是转过去了。如果胶上还有Marker的话就是转膜不完全咯。
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2011-03-07 11:34:55
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三磷酸腺苷
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专业: 神经系统肿瘤(含特殊感受
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最爱花诗雨(金币+2): 鼓励参与 2011-03-07 18:36:29
滤纸上有marker?你不会电极插错方向了吧…………
我们用湿转
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3楼
2011-03-07 11:40:03
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lys0704
银虫
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专业: 生物大分子结构与功能
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最爱花诗雨(金币+2): 谢谢分享经验~ 2011-03-07 18:37:02
我用的是半干转膜,条件是1.5或2mA每平方厘米30min,滤纸上有和目的蛋白大小相当的预染Marker,说明转膜转过了
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4楼
2011-03-07 13:27:13
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