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【求助】HPLC有鬼峰出现,急寻解决方案已有40人参与
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A相是25mmol KH2PO4水溶液,B相是乙腈,方法为0-5min,5%B;5-12min,5%-60%B;12-24min,60%B;24-34min,5%B。 岛津四元泵,检测器为PDA的,每次都会在14.5min出现鬼峰(检测波长为210nm) 走空白也有,重新配缓冲盐仍然有,关键换柱子走空白也有此峰出现(出峰时间不一样,峰型大致一致),更换缓冲盐为去离子水走空白,基线平稳。 首先考虑是流动相出了问题,但缓冲盐是每天重新配,0.22um的膜过滤后超声,每天走样之前首先走空白,峰高时高时低,重要的是中间产物的峰就出在14.5min,鬼峰和主峰的紫外吸收不一样,很明显包在主峰里面了,很苦恼,找不到原因在哪。 |
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