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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】HPLC有鬼峰出现，急寻解决方案
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50528061

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】HPLC有鬼峰出现，急寻解决方案已有40人参与

A相是25mmol KH2PO4水溶液，B相是乙腈，方法为0-5min，5%B；5-12min，5%-60%B；12-24min,60%B；24-34min，5%B。
   岛津四元泵，检测器为PDA的，每次都会在14.5min出现鬼峰（检测波长为210nm）
    走空白也有，重新配缓冲盐仍然有，关键换柱子走空白也有此峰出现（出峰时间不一样，峰型大致一致），更换缓冲盐为去离子水走空白，基线平稳。
    首先考虑是流动相出了问题，但缓冲盐是每天重新配，0.22um的膜过滤后超声，每天走样之前首先走空白，峰高时高时低，重要的是中间产物的峰就出在14.5min，鬼峰和主峰的紫外吸收不一样，很明显包在主峰里面了，很苦恼，找不到原因在哪。
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1楼2011-03-05 10:13:44
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gabriella

新虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 50528061 at 2011-03-05 10:13:44:
A相是25mmol KH2PO4水溶液，B相是乙腈，方法为0-5min，5%B；5-12min，5%-60%B；12-24min,60%B；24-34min，5%B。
   岛津四元泵，检测器为PDA的，每次都会在14.5min出现鬼峰（检测波长为210nm）
    走空白也有， ...

以前走梯度 好好的，做了一段时间后，出现莫名其妙的坡度，冲柱子许久不见效果，流动相各个组分都换，不见效果，换根柱子依旧有坡度， 后来将A,B都换成乙腈走梯度，恢复正常，没有坡度，  但是A换成水相继续又坡度，
后来莫名其妙大约折磨了我两天后， 一切恢复正常，至今未找到原因，只是结果好了
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吼吼
34楼2011-03-10 18:24:17
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