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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】请教，DNA浓度怎么测定
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黑森林

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】请教，DNA浓度怎么测定 已有16人参与

弱弱问个问题

提完基因组DNA后，测定浓度

用分光光度计测得OD260=1.00
根据公式计算浓度=1.000（OD260） * 50（ug/ml） *100（稀释倍数） =5 ug/ul

然后根据凝胶电泳，测得50 ng/ul

怎么差别这么大？
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1楼 2011-03-01 19:46:34
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tanyu_hu

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★
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lstt09nk(金币+3): 鼓励新虫交流 2011-03-02 18:18:40
引用回帖:
Originally posted by 黑森林 at 2011-03-01 19:46:34:
弱弱问个问题

提完基因组DNA后，测定浓度

用分光光度计测得OD260=1.00
根据公式计算浓度=1.000（OD260） * 50（ug/ml） *100（稀释倍数） =5 ug/ul

然后根据凝胶电泳，测得50 ng/ul

怎么差别这么大？

你可以用稀释梯度来验证一下用分光光度计测的是否准，如稀释25倍，50倍，100倍，如果得到的OD260值也成比例的话，说明分光光度计测得还是准的。
另外基因组DNA电泳会有很多带吧。
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10楼2011-03-02 11:09:15
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
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lstt09nk(金币+1): 感谢交流 2011-03-02 18:17:04
当然是分光光度计准确了……电泳这么粗糙只是估算

另外电泳的数值你是如何估算出来的？
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2楼2011-03-01 20:44:53
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黑森林

金虫 (小有名气)
电泳是根据marker 定量的

但是两种方法差别也太大了……
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3楼2011-03-01 20:46:39
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yabing0324

金虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 黑森林 at 2011-03-01 19:46:34:
弱弱问个问题

提完基因组DNA后，测定浓度

用分光光度计测得OD260=1.00
根据公式计算浓度=1.000（OD260） * 50（ug/ml） *100（稀释倍数） =5 ug/ul

然后根据凝胶电泳，测得50 ng/ul

怎么差别这么大？

我们用的是核酸蛋白定量仪，打进去1.5微升，直接出浓度
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4楼2011-03-01 20:47:21
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