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【求助/交流】如何提取不带质粒的细菌总DNA?
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tingspdf
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[交流]
【求助/交流】如何提取不带质粒的细菌总DNA?
如题,实验需要所提取DNA不能带有质粒污染,
不依赖细菌培养
这一目的能否达到?
最好能帮忙找到相关文献,必有重谢!
[
Last edited by tingspdf on 2011-2-25 at 21:14
]
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tingspdf(金币+5): 谢谢,问题基本解决了,如果是cul-independ的话,是否可以做原位质粒消除实验? 2011-02-25 22:07:01
lstt09nk(金币+3): 感谢参与 2011-02-26 08:55:47
引用回帖:
Originally posted by
brightfuture01
at 2011-02-25 21:17:15:
,culture-independent 还不要质粒的不知道咋做。。。。
呵呵,如果你提取的是环境样品总DNA的话,你会发现,脉冲场凝胶电泳结果也是smear的,因为它的分辨率高了,并不像是平常我们跑的那种,完整的一条23kb带。
所以这种方法基本上仍旧分不开总DNA和质粒。
再者,你culture-independent的话,质粒的丰度很低,跑电泳你都看不到质粒,何谈区分总DNA与质粒DNA呢?
[
Last edited by brightfuture01 on 2011-2-25 at 21:57
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2011-02-25 21:56:29
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tingspdf(金币+1): 谢谢,不培养细菌的话能做吗 2011-02-25 21:14:33
先做质粒消除实验,然后培养不含质粒的菌,提取DNA
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2011-02-25 21:12:10
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tingspdf(金币+2): 能不能通过PFGE纯化所提取的总DNA,去掉分子量小的质粒DNA来达到目的? 2011-02-25 21:45:18
,culture-independent 还不要质粒的不知道咋做。。。。
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2011-02-25 21:17:15
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lstt09nk(金币+1): 鼓励交流 2011-02-25 21:35:10
tingspdf(金币+1): 谢谢 2011-02-25 21:45:25
先把质粒降解掉,然后再提取细菌基因组!
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2011-02-25 21:29:40
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