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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 【求助/交流】如何提高mRNA分离试剂盒的效率
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cfind

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】如何提高mRNA分离试剂盒的效率 已有2人参与

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我所用的试剂盒是QIAGEN的Oligotex的mRNA小提试剂盒，每次分离mRNA时效率总是太低，1mg的总RNA最后只能得到不到2ug，请教一下怎样可以提高效率？
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1楼 2010-06-30 16:11:21
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holyala

木虫 (著名写手)

砖家
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+2):谢谢交流 2010-06-30 17:48:55
按mRNA占总RNA的2~5%来算，你这个得率确实太低了，2‰？看一下总RNA质量吧，Oligotex应该是利用Oligo dT与mRNA的poly(A)结合将mRNA纯化出来的，如果有降解的话肯定就得不到多少咯。
另外，invitrogen的Dynabeads mRNA Purification Kit也很好，不妨试试。
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2楼2010-06-30 17:30:58
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cfind

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by holyala at 2010-06-30 17:30:58:
按mRNA占总RNA的2~5%来算，你这个得率确实太低了，2‰？看一下总RNA质量吧，Oligotex应该是利用Oligo dT与mRNA的poly(A)结合将mRNA纯化出来的，如果有降解的话肯定就得不到多少咯。
另外，invitrogen的Dynabeads ...

O(∩_∩)O谢谢，我的总RNA的质量还行，三条带都挺清晰的，28S:18S=2:1,不过有一点点DNA污染。操作步骤严格按照说明书来的，过不过柱子都试过了，可是还是不行。
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3楼2010-06-30 20:33:20
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