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cfind

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】如何提高mRNA分离试剂盒的效率 已有2人参与

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我所用的试剂盒是QIAGEN的Oligotex的mRNA小提试剂盒,每次分离mRNA时效率总是太低,1mg的总RNA最后只能得到不到2ug,请教一下怎样可以提高效率?
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holyala

木虫 (著名写手)

砖家

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+2):谢谢交流 2010-06-30 17:48:55
按mRNA占总RNA的2~5%来算,你这个得率确实太低了,2‰?看一下总RNA质量吧,Oligotex应该是利用Oligo dT与mRNA的poly(A)结合将mRNA纯化出来的,如果有降解的话肯定就得不到多少咯。
另外,invitrogen的Dynabeads mRNA Purification Kit也很好,不妨试试。
2楼2010-06-30 17:30:58
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cfind

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by holyala at 2010-06-30 17:30:58:
按mRNA占总RNA的2~5%来算,你这个得率确实太低了,2‰?看一下总RNA质量吧,Oligotex应该是利用Oligo dT与mRNA的poly(A)结合将mRNA纯化出来的,如果有降解的话肯定就得不到多少咯。
另外,invitrogen的Dynabeads ...

O(∩_∩)O谢谢,我的总RNA的质量还行,三条带都挺清晰的,28S:18S=2:1,不过有一点点DNA污染。操作步骤严格按照说明书来的,过不过柱子都试过了,可是还是不行。
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3楼2010-06-30 20:33:20
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