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梦想起飞

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】已有部分序列，如何获得全长？ 已有6人参与

材料是梭菌，具体菌株型号未知。想得到一个功能基因的全长，但是现在只通过同源克隆得到了这个基因的中间一段，700多bp，而基因全长是1400左右。请问如何能得到它的全长呢？最近查了查，知道可以做RACE，但是有点贵哈，老板最近手头紧。再说提RNA也有点复杂。除了RACE，大家还有什么方法呢？高手指点啊！小女子谢谢啦！
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1楼 2010-12-21 10:55:03
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diaoyuhua

金虫 (小有名气)
好像大家都在用RACE
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2楼2010-12-21 11:11:37
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梦想起飞

铜虫 (小有名气)
silicare:对于虫友的解答，你给一个表情是什么意思？？这样是对别人的帮助的不尊重 2010-12-21 11:46:16
引用回帖:
Originally posted by diaoyuhua at 2010-12-21 11:11:37:
好像大家都在用RACE

3楼2010-12-21 11:24:21
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1):Tail-PCR不错，以前做过，但PCR结果也不太稳定 2010-12-21 14:18:18
引用回帖:
Originally posted by 梦想起飞 at 2010-12-21 10:55:03:
材料是梭菌，具体菌株型号未知。想得到一个功能基因的全长，但是现在只通过同源克隆得到了这个基因的中间一段，700多bp，而基因全长是1400左右。请问如何能得到它的全长呢？最近查了查，知道可以做RACE，但是有点 ...

梭菌是原核的，又不含内含子，你提RNA做什么啊。直接用TAIL-PCR或者 Clontech 的genome walking kit 就可以了。
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
4楼2010-12-21 12:05:23
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
直接用genome walking kit好了，但是也不便宜的。
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5楼2010-12-21 12:46:52
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rioarsenal

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 梦想起飞 at 2010-12-21 10:55:03:
材料是梭菌，具体菌株型号未知。想得到一个功能基因的全长，但是现在只通过同源克隆得到了这个基因的中间一段，700多bp，而基因全长是1400左右。请问如何能得到它的全长呢？最近查了查，知道可以做RACE，但是有点 ...

我物美价廉的方法：锚定PCR，我用过，挺好。
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6楼2010-12-21 13:35:06
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梦想起飞

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by lxj341401 at 2010-12-21 12:46:52:
直接用genome walking kit好了，但是也不便宜的。

不好意思，小女子才疏学浅，请问这个kit是干什么用的呢？原理是什么呢？多谢！
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7楼2010-12-21 14:13:14
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梦想起飞

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by rioarsenal at 2010-12-21 13:35:06:


我物美价廉的方法：锚定PCR，我用过，挺好。

锚定PCR？我没有做过这个，请问具体怎么做的呢？多谢赐教啊！！
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8楼2010-12-21 14:14:16
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梦想起飞

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2010-12-21 12:05:23:



梭菌是原核的，又不含内含子，你提RNA做什么啊。直接用TAIL-PCR或者 Clontech 的genome walking kit 就可以了。

我也有此疑惑，可是要做RACE不是得先反转录吗？……呃……我也矛盾了……
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9楼2010-12-21 14:15:38
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rainwander

铁杆木虫 (知名作家)

优秀版主
Tail-PCR
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千万不要因为走的太久，而忘记了我们为什么出发~~~~~~ForDream~~~~~~
10楼2010-12-21 14:17:01
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