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梦想起飞

铜虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】已有部分序列，如何获得全长？已有6人参与

材料是梭菌，具体菌株型号未知。想得到一个功能基因的全长，但是现在只通过同源克隆得到了这个基因的中间一段，700多bp，而基因全长是1400左右。请问如何能得到它的全长呢？最近查了查，知道可以做RACE，但是有点贵哈，老板最近手头紧。再说提RNA也有点复杂。除了RACE，大家还有什么方法呢？高手指点啊！小女子谢谢啦！

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1楼 2010-12-21 10:55:03

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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1):Tail-PCR不错，以前做过，但PCR结果也不太稳定 2010-12-21 14:18:18

引用回帖:

Originally posted by 梦想起飞 at 2010-12-21 10:55:03:
材料是梭菌，具体菌株型号未知。想得到一个功能基因的全长，但是现在只通过同源克隆得到了这个基因的中间一段，700多bp，而基因全长是1400左右。请问如何能得到它的全长呢？最近查了查，知道可以做RACE，但是有点 ...

梭菌是原核的，又不含内含子，你提RNA做什么啊。直接用TAIL-PCR或者 Clontech 的genome walking kit 就可以了。