| 查看: 1749 | 回复: 4 | |||
[交流]
【求助/交流】sds聚丙烯酰胺电泳上样问题
|
|
大家好！我是菜鸟，原来没做过这方面试验 现在的问题是：我的三个样品蛋白浓度分别大致是1mg/ml 2mg/ml 3mg/ml 用的电泳仪六一电泳仪 dycz-24a,是1mm玻璃板间隙，梳子是20孔的 问题1：按蛋白上样20微克的话，用2倍的还是5倍的上样缓冲液啊？我用的缓冲液是含ddt的，配置的时候貌似很难配啊？不溶解.求合适的上样缓冲液配方 2：marker推荐上样量是10微升，如果样品上20微升的话，可以吗？每个孔的上样蛋白量一样外，上样体积也必须相同吗？ 3：marker用和上样缓冲液混合吗？ 4：20个孔，每个孔都必须上样吗？？可不可以留几个不上啊？？如果必须上的话只需要用上样缓冲液替代吗？ 谢谢各位大侠！  |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有181人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 有关聚丙烯酰胺凝胶电泳的几个问题
已经有11人回复
- 聚丙烯酰胺凝胶电泳问题的讨论
已经有17人回复
- 做SRAP标记的进来，DNA聚丙烯酰胺电泳，预电泳问题。。。
已经有22人回复
- 聚丙烯酰胺凝胶电泳灌胶后能放多久
已经有17人回复
- Western Blot电泳蛋白质外漏问题求助
已经有22人回复
- 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，染色问题
已经有8人回复
- 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳制板的问题
已经有24人回复
- SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳求助
已经有14人回复
- 【求助】WB过程中跑电泳时，蛋白质外漏
已经有5人回复
2楼2011-02-24 21:15:55
★ ★ ★
lstt09nk(金币+3): 辛苦~~ 2011-02-24 22:59:52
3515(金币+3): 2011-02-25 07:50:12
lstt09nk(金币+3): 辛苦~~ 2011-02-24 22:59:52
3515(金币+3): 2011-02-25 07:50:12
|
问题1：按蛋白上样20微克的话，用2倍的还是5倍的上样缓冲液啊？我用的缓冲液是含ddt的，配置的时候貌似很难配啊？不溶解.求合适的上样缓冲液配方 都行，我们实验室好像一直都用是3倍的。 2：marker推荐上样量是10微升，如果样品上20微升的话，可以吗？每个孔的上样蛋白量一样外，上样体积也必须相同吗？ 20微升会不会冒出点样孔来？一般上样5-10微升就可以了，体积不是必须一样的 3：marker用和上样缓冲液混合吗？ 如果你买来的Marker没有混合上样缓冲液的话就要混合；如果已经混好的话，就不必了。 4：20个孔，每个孔都必须上样吗？？可不可以留几个不上啊？？如果必须上的话只需要用上样缓冲液替代吗？ 不是必须都上样的。有人说，不上满的话，会影响挨着空样孔那个样品条带的美观，这个我没验证。如果上的话，用上样缓冲液即可。 |
3楼2011-02-24 21:16:37
4楼2011-02-24 22:06:50
5楼2011-02-25 20:42:39
10