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铜虫 (初入文坛)

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虫号: 831788

[交流] 【求助/交流】sds聚丙烯酰胺电泳上样问题

大家好！我是菜鸟，原来没做过这方面试验
现在的问题是：我的三个样品蛋白浓度分别大致是1mg/ml 2mg/ml 3mg/ml
用的电泳仪六一电泳仪 dycz-24a,是1mm玻璃板间隙，梳子是20孔的

问题1：按蛋白上样20微克的话，用2倍的还是5倍的上样缓冲液啊？我用的缓冲液是含ddt的，配置的时候貌似很难配啊？不溶解.求合适的上样缓冲液配方

2：marker推荐上样量是10微升，如果样品上20微升的话，可以吗？每个孔的上样蛋白量一样外，上样体积也必须相同吗？

3：marker用和上样缓冲液混合吗？

4：20个孔，每个孔都必须上样吗？？可不可以留几个不上啊？？如果必须上的话只需要用上样缓冲液替代吗？

谢谢各位大侠！