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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】求助关于实时定量PCR
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xuehu2008

铜虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】求助关于实时定量PCR

各位兄弟姐妹，
我做某miRNA的定量PCR，前段时间效果一直很好。不知为什么这两次做的融解曲线的峰（纵坐标为荧光值）都要比原来低很多，原来的峰基本上和内参U6的峰一样高，但现在基本上只有之前的一半。请教这是怎么回事？所有的条件都是一样的。
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1楼 2011-02-21 20:42:46
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)
xuehu2008(金币+5): 2011-02-23 09:35:06
xuehu2008(金币+5): 2011-02-25 15:09:36
ct值升高
可见是mix效率降低，或者模板有降解
从这两方面着手就行了
用新买的mix试一下，还不行就是模板出现了降解了
首先怀疑mix
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9楼2011-02-23 08:31:05
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sutao1979

木虫 (著名写手)
★
xuehu2008(金币+1):谢谢参与
xuehu2008(金币+2): 2011-02-22 10:49:33

检查一下fluorescent dye是否有问题，这些都是要避光的
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3楼2011-02-22 02:05:25
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xuehu2008

铜虫 (正式写手)

dye一直是避光保存的，没有什么变化啊。
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4楼2011-02-22 10:50:11
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)
★ ★
xuehu2008(金币+1):谢谢参与
lstt09nk(金币+1): 鼓励交流 2011-02-22 14:51:49
xuehu2008(金币+2): 2011-02-22 14:58:26

染料问题，买的试剂盒？
不过不影响结果
结果很好
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2011-02-22 12:24:29
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