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baby1_9253344

金虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】弱弱地问一句,质粒提取试剂盒使用前需要灭菌吗

自己搜了一下,站内没人问这个问题的,估计实在是太低级的问题了。因为我是化学专业的,现在涉足生物,深感隔行如隔山...总是弄不清楚什么时候该无菌操作,什么时候不用....
废话少说。切正题。
现需用试剂盒提质粒,然后把提出来的质粒转化到菌株里。试剂盒说明书上一直也没提是否需要无菌操作,参考了前人的毕业论文,他的试验试剂配制里提到要高压灭菌,但是我有点疑惑了,提质粒要用到的溶液I里有葡萄糖,不能121度灭菌的,溶液III里的冰乙酸容易挥发的,灭菌之后浓度就不准确了啊?另外过程中还用到碱,还有氯仿什么的,想必这种有毒的东东不用灭菌也是无菌的。想要请教一下各位,平时都是怎么做的?还有,如果提质粒时候试剂盒没有灭菌,有什么影响。多谢~~
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怎么都行

银虫 (小有名气)


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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
baby1_9253344(金币+1): 谢谢哈 2011-02-18 16:05:46
dhd997(金币+1): 有道理 2011-02-19 12:41:18
引用回帖:
Originally posted by baby1_9253344 at 2011-02-18 15:56:11:

那,如果操作过程不是严格无菌的,提出来的质粒可以直接用来转化进细胞里吗?不会有影响吗?

空气中的菌一般不会有质粒,即使有,相对于你要提取的大量细菌来说也是微不足道,可以忽略不计的
5楼2011-02-18 15:59:08
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baby1_9253344

金虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by fjt198719 at 2011-02-18 15:47:33:
不需要的

那,如果操作过程不是严格无菌的,提出来的质粒可以直接用来转化进细胞里吗?不会有影响吗?
3楼2011-02-18 15:56:11
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怎么都行

银虫 (小有名气)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
不用灭菌,使用试剂盒就照它的说明书来就行。
4楼2011-02-18 15:57:06
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baby1_9253344

金虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by 怎么都行 at 2011-02-18 15:59:08:

空气中的菌一般不会有质粒,即使有,相对于你要提取的大量细菌来说也是微不足道,可以忽略不计的

那,我在坛子里一知半解的看到的神马质粒降解是怎么回事啊?
6楼2011-02-18 16:04:42
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