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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】弱弱地问一句，质粒提取试剂盒使用前需要灭菌吗
汕头大学海洋科学接受调剂
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baby1_9253344

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】弱弱地问一句，质粒提取试剂盒使用前需要灭菌吗

自己搜了一下，站内没人问这个问题的，估计实在是太低级的问题了。因为我是化学专业的，现在涉足生物，深感隔行如隔山...总是弄不清楚什么时候该无菌操作，什么时候不用....
废话少说。切正题。
现需用试剂盒提质粒，然后把提出来的质粒转化到菌株里。试剂盒说明书上一直也没提是否需要无菌操作，参考了前人的毕业论文，他的试验试剂配制里提到要高压灭菌，但是我有点疑惑了，提质粒要用到的溶液I里有葡萄糖，不能121度灭菌的，溶液III里的冰乙酸容易挥发的，灭菌之后浓度就不准确了啊？另外过程中还用到碱，还有氯仿什么的，想必这种有毒的东东不用灭菌也是无菌的。想要请教一下各位，平时都是怎么做的？还有，如果提质粒时候试剂盒没有灭菌，有什么影响。多谢~~
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1楼 2011-02-18 15:46:23
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fjt198719

木虫 (著名写手)
baby1_9253344(金币+1): 3Q 2011-02-18 16:05:17
不需要的
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2楼2011-02-18 15:47:33
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baby1_9253344

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by fjt198719 at 2011-02-18 15:47:33:
不需要的

那，如果操作过程不是严格无菌的，提出来的质粒可以直接用来转化进细胞里吗？不会有影响吗？
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3楼2011-02-18 15:56:11
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怎么都行

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
不用灭菌，使用试剂盒就照它的说明书来就行。
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4楼2011-02-18 15:57:06
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怎么都行

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
baby1_9253344(金币+1): 谢谢哈 2011-02-18 16:05:46
dhd997(金币+1): 有道理 2011-02-19 12:41:18
引用回帖:
Originally posted by baby1_9253344 at 2011-02-18 15:56:11:

那，如果操作过程不是严格无菌的，提出来的质粒可以直接用来转化进细胞里吗？不会有影响吗？

空气中的菌一般不会有质粒，即使有，相对于你要提取的大量细菌来说也是微不足道，可以忽略不计的
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5楼2011-02-18 15:59:08
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baby1_9253344

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 怎么都行 at 2011-02-18 15:59:08:

空气中的菌一般不会有质粒，即使有，相对于你要提取的大量细菌来说也是微不足道，可以忽略不计的

那，我在坛子里一知半解的看到的神马质粒降解是怎么回事啊？
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6楼2011-02-18 16:04:42
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怎么都行

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by baby1_9253344 at 2011-02-18 16:04:42:

那，我在坛子里一知半解的看到的神马质粒降解是怎么回事啊？

质粒大分子降解断裂成小分子片断了呗
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7楼2011-02-18 16:19:15
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wuw579

铁杆木虫 (正式写手)
baby1_9253344(金币+1): 2011-02-19 11:01:03

我从来没有灭过   质粒转染细胞  结果照样很好
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8楼2011-02-18 20:57:42
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ivery

铜虫 (小有名气)
baby1_9253344(金币+1): 3Q 2011-02-19 16:29:28

不用灭，转化完后，验证下就好
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9楼2011-02-19 11:15:02
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夏尔list

金虫 (著名写手)
★
scelab(金币+1): 谢谢交流 2011-02-20 09:30:53

不用灭菌~~~看说明书上面很详细的~最后加的洗脱液可以微波炉加热几十秒
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10楼2011-02-19 22:13:32
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qdeev

金虫 (正式写手)

不用
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11楼2011-02-20 08:42:06
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skkyy88888

铜虫 (著名写手)
baby1_9253344(金币+1): 呵呵，谢了 2011-02-21 09:07:42

真是隔行如隔山啊。不需要的。
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12楼2011-02-20 17:48:08
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司徒雨星

新虫 (初入文坛)
不用的
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13楼2012-09-04 19:52:41
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