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baggio00009

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】求助，新手组培及细胞悬浮培养

大家好，我是新手做组培及细胞培养，有几个问题想问问大家。
1.我想问问做MS培养基的时候激素应该在灭菌之前加还是之后加？要是在灭菌之后加比较好的话，应该如何操作才能不染菌呢
2.我做的植物在悬浮细胞培养继代的时候，我通常是过滤后取一定重量的细胞放入新培养基中，但是这种植物细胞很难过滤，很费时间，所以经常会染菌，我很郁闷，不知道我这么做对不对，是不是有其他的什么解决办法。
3. 有没有细胞悬浮培养方面比较好的书或者材料推荐一下，最好是实验方面的。不胜感激
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1楼2011-02-15 22:06:13
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曾经遥远

银虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by ziman2003 at 2011-02-16 16:38:15:
您好！
我在研究生阶段做了大量的组培工作，主要是愈伤和诱导的过程。
首先，对于你说的激素的问题，所有的激素，包括生长素，细胞分裂素等等，都是需要0.22um的过滤器除菌过滤。然后待灭菌后的培养基室温凉至 ...

学长你好，我想问一下灭菌后的培养基添加激素怎么操作才能使培养基不受污染呢？
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11楼2011-02-25 10:13:10
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wqj1988926

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
dhd997(金币+3): good 2011-02-16 10:39:34
baggio00009(金币+1): 2011-02-16 17:25:06
baggio00009(金币+1): 2011-02-22 17:59:17
1.我们实验室一般都是加好后高温灭菌的
2.如需定量的话，将天平置于超净台紫外照射灭菌后，将培养器皿整体放入调零，定量初始细胞量
3关于书籍方面可以去你们的图书馆看看，我一般在我们图书馆能满足我的需求。
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2楼2011-02-16 08:45:32
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ziman2003

银虫 (小有名气)
★ ★
baggio00009(金币+1): 2011-02-16 17:24:58
baggio00009(金币+1): 2011-02-18 02:00:21
dhd997(金币+2): 欢迎交流 2011-02-18 10:54:02
baggio00009(金币+1): 2011-02-22 17:59:09
您好！
我在研究生阶段做了大量的组培工作，主要是愈伤和诱导的过程。
首先，对于你说的激素的问题，所有的激素，包括生长素，细胞分裂素等等，都是需要0.22um的过滤器除菌过滤。然后待灭菌后的培养基室温凉至45度左右，加入激素。因为激素在高温下容易降解的。
其次，我没有做过细胞的悬浮培养，你可以找一些组织培养教材看看。好像本科的组织培养教材中就有描述，或者有关组培的实验指导技术。
希望对你有所帮助。
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3楼2011-02-16 16:38:15
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dacaoyuan5330

木虫 (小有名气)
baggio00009(金币+1): 2011-02-18 02:00:15
好像有本书 专门介绍怎样做细胞培养的 暂时忘记了 过后告诉你
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4楼2011-02-16 17:22:26
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