应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】水稻叶片RNA提取问题
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 3173  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

松上云雀

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】水稻叶片RNA提取问题

最近提取水稻叶片RNA总是发生降解，不知道什么原因。
跑胶图片显示28S条带没有问题，但是18s下边有降解条带。
提取方法是Trizol法提取，材料是水稻叶片。
大家有什么建议呀？
我把提取RNA的步骤写一下
①用液氮将样品研磨至粉末，取0.1g粉末加入预先装有1ml Trizol的离心管中，摇匀。
②2-8℃下12000g离心10min，将RNA的上清液移入1.5ml离心管中。
③在15-30℃下放置5min，加0.2ml氯仿，剧烈振荡15sec，室温下温浴2-3min。2-8℃下，≤12000g离心15min，把水相移入另一1.5ml离心管中。
④加0.5ml氯仿剧烈振荡15sec，室温下温浴2-3min；2-8℃下，≤12000g离心10min，
⑤取上清，加入500ul异丙醇，沉淀10分钟，12000g离心10min

⑥加入1ml 75%乙醇，2-8℃下≤7500g离心5min，小心将上清液倒掉。
⑦将离心管倒扣在吸水纸上5-10min，每管加30μl的DEPC水，可在55-60℃助溶10min。
最后取2ul电泳。
Trizol使用的是Invitrogen的。

[ Last edited by 松上云雀 on 2011-1-26 at 20:01 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-01-25 21:24:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longrna

新虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
我觉得带条多并不说明降解，smear倒很可能是降解。
降解是随机的，所以不应该降解成统一大小的条带。
其实电泳时主要看条带有没有锋利，边缘清不清晰，其次再看条带。
当然了，如果是普通的琼脂糖（非变性）条带边缘有一点点的模糊也可以理解。
赞一下(1人) 回复此楼
15楼2011-12-19 09:27:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

tigertang

木虫 (著名写手)
建议上图，这样大家好分析！
赞一下 回复此楼
2楼2011-01-26 07:43:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

松上云雀

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by tigertang at 2011-01-26 07:43:16:
建议上图，这样大家好分析！

我跑的电泳看了看，没有拍照，直接扔掉了。
跑出来的图片就是18s下边还有多条条带。
赞一下 回复此楼
3楼2011-01-26 10:13:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rioarsenal

金虫 (正式写手)
★ ★
翱宇(金币+2): 谢谢分享经验。 2011-01-26 15:08:26
松上云雀(金币+1): 谢谢，我想问下，你们无菌操作台怎么消毒的呀？就是开一开紫外吗？ 2011-01-26 20:02:14
所有不能干热灭菌的，用DEPC水处理24小时以上，其他一律180度干热灭菌4小时。异丙醇等试剂用新的，无菌操作台认真消毒。。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-01-26 14:32:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703调剂，一志愿天津大学319分 +16 haaaabcd 2026-04-05 17/850 2026-04-06 19:25 by 尚水阁主
[考研] 307求调剂 +3 所念及所望 2026-04-06 3/150 2026-04-06 17:30 by 土木硕士招生
[考研] 22408 331分求调剂 +4 y__1 2026-04-06 4/200 2026-04-06 17:26 by 土木硕士招生
[考研] 求调剂到材料 +5 程9915 2026-04-06 5/250 2026-04-06 15:21 by yulian1987
[考研] 0854求调剂 +4 assdll 2026-04-05 4/200 2026-04-06 12:29 by 中飞院空管学院�
[考研] 080200学硕，277分，数一104，求带走！ +7 瓶子PZ 2026-03-31 7/350 2026-04-05 17:49 by liucky
[考研] 数一英一274机械调剂 +5 星陨流霞 2026-04-04 6/300 2026-04-05 11:38 by arrow8852
[考研] 081700学硕，323分，一志愿中国海洋大学求调剂学校 +16 披星河 2026-04-04 16/800 2026-04-05 11:27 by 猪会飞
[考研] 278求调剂 +3 依旧！ 2026-04-02 4/200 2026-04-04 20:27 by 蓝云思雨
[考研] 321求调剂 +13 认真求上学 2026-04-02 13/650 2026-04-04 18:23 by macy2011
[论文投稿] 求文献 5+3 ys879651$ 2026-04-02 3/150 2026-04-04 17:22 by bobvan
[考研] 357求调剂 +13 1050389037 2026-04-03 13/650 2026-04-03 22:27 by 无际的草原
[考研] 求调剂机会 +5 意染ivy 2026-04-03 5/250 2026-04-03 15:13 by qoooooo614
[考研] 326分求调剂 +3 于是乎呢 2026-04-01 5/250 2026-04-03 14:23 by 于是乎呢
[考研] 085600专硕材料与化工348分求调剂 +10 上学啦！ 2026-04-01 11/550 2026-04-03 14:13 by 百灵童888
[考研] 求调剂 +3 usbdndj 2026-04-03 3/150 2026-04-03 14:10 by dxiaoxin
[考研] 生物学308分求调剂（一志愿华东师大） +6 相信必会光芒万� 2026-03-31 7/350 2026-04-02 23:16 by JourneyLucky
[考研] 353求调剂 +4 拉钩不许变 2026-04-01 4/200 2026-04-01 18:10 by 记事本2026
[考研] 340求调剂 +4 希望如此i 2026-03-31 4/200 2026-03-31 16:40 by 690616278
[考研] 313求调剂 +6 卖个关子吧 2026-03-31 6/300 2026-03-31 10:58 by Jaylen.
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭