24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 3177  |  回复: 15
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

松上云雀

木虫 (正式写手)


[交流] 【求助/交流】水稻叶片RNA提取问题

最近提取水稻叶片RNA总是发生降解,不知道什么原因。
跑胶图片显示28S条带没有问题,但是18s下边有降解条带。
提取方法是Trizol法提取,材料是水稻叶片。
大家有什么建议呀?
我把提取RNA的步骤写一下
①用液氮将样品研磨至粉末,取0.1g粉末加入预先装有1ml Trizol的离心管中,摇匀。
②2-8℃下12000g离心10min,将RNA的上清液移入1.5ml离心管中。
③在15-30℃下放置5min,加0.2ml氯仿,剧烈振荡15sec,室温下温浴2-3min。2-8℃下,≤12000g离心15min,把水相移入另一1.5ml离心管中。
④加0.5ml氯仿剧烈振荡15sec,室温下温浴2-3min;2-8℃下,≤12000g离心10min,
⑤取上清,加入500ul异丙醇,沉淀10分钟,12000g离心10min

⑥加入1ml 75%乙醇,2-8℃下≤7500g离心5min,小心将上清液倒掉。
⑦将离心管倒扣在吸水纸上5-10min,每管加30μl的DEPC水,可在55-60℃助溶10min。
最后取2ul电泳。
Trizol使用的是Invitrogen的。

[ Last edited by 松上云雀 on 2011-1-26 at 20:01 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

c20050566

银虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
哎, 我跑的都有smear 看来是保存RNA 不当.
13楼2011-12-18 23:54:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

tigertang

木虫 (著名写手)


建议上图,这样大家好分析!
2楼2011-01-26 07:43:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

松上云雀

木虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by tigertang at 2011-01-26 07:43:16:
建议上图,这样大家好分析!

我跑的电泳看了看,没有拍照,直接扔掉了。
跑出来的图片就是18s下边还有多条条带。
3楼2011-01-26 10:13:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rioarsenal

金虫 (正式写手)


★ ★
翱宇(金币+2): 谢谢分享经验。 2011-01-26 15:08:26
松上云雀(金币+1): 谢谢,我想问下,你们无菌操作台怎么消毒的呀?就是开一开紫外吗? 2011-01-26 20:02:14
所有不能干热灭菌的,用DEPC水处理24小时以上,其他一律180度干热灭菌4小时。异丙醇等试剂用新的,无菌操作台认真消毒。。
5楼2011-01-26 14:32:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿北京2,材料与化工308求调剂 +13 熊二想上岸 2026-04-04 14/700 2026-04-06 19:42 by guanxin1001
[考研] 生物学调剂 可调剂到生物与医药 +3 李政莹 2026-04-06 3/150 2026-04-06 19:02 by macy2011
[考研] 一志愿南昌大学,085600,344分求调剂 +9 调剂上岸玘 2026-04-05 10/500 2026-04-06 09:30 by dongzh2009
[考研] 材料专硕322分 +10 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-04 10/500 2026-04-05 21:22 by 学员8dgXkO
[考研] 计算机11408,286分求调剂 +7 木子念晞 2026-04-05 7/350 2026-04-05 19:02 by chy09050039
[考研] 307分材料专业求调剂 +7 Hll胡 2026-04-05 7/350 2026-04-05 18:47 by 无际的草原
[考研] 312求调剂 +3 Say Never 2026-04-04 3/150 2026-04-05 11:19 by guoweigw
[考研] 考研调剂 +3 mcbbc 2026-04-04 3/150 2026-04-05 10:03 by barlinike
[考研] 313求调剂 +3 海日海日 2026-04-04 3/150 2026-04-05 07:48 by 544594351
[考研] 求调剂 +6 朔朔话 2026-04-02 7/350 2026-04-04 19:16 by 蓝云思雨
[考研] 348分环境工程·调剂 +10 吴彦祖24k 2026-04-03 11/550 2026-04-04 14:19 by 无际的草原
[考研] 一志愿华中农业071010,总分320求调剂 +7 困困困困坤坤 2026-04-02 7/350 2026-04-03 17:26 by Yuena_Wang
[考研] 英一数一408,总分284,二战真诚求调剂 +13 12.27 2026-03-30 15/750 2026-04-03 14:41 by 氮气气气
[考研] 一志愿中国科学院大学265求调剂 +9 恬淡ye 2026-03-31 10/500 2026-04-03 11:10 by txp1986
[考研] 312求调剂 +4 赊月色 2026-04-02 5/250 2026-04-03 08:21 by fangshan711
[考研] 材料专业求调剂 +10 月月鸟木 2026-04-01 10/500 2026-04-02 12:57 by wxiongid
[考研] 材料求调剂 +10 呢呢妮妮 2026-04-01 13/650 2026-04-02 09:17 by olim
[考研] 08生物与医药专硕初试346找调剂 +6 dianeeee 2026-04-01 7/350 2026-04-02 08:23 by guoweigw
[考研] 一志愿北京科技大学085601材料工程英一数二初试总分335求调剂 +5 双马尾痞老板2 2026-03-31 5/250 2026-04-01 09:04 by oooqiao
[考研] 323分 食品与营养调剂 +3 嘿ooo 2026-03-31 3/150 2026-03-31 09:38 by longlotian
信息提示
请填处理意见