应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】水稻叶片RNA提取问题
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 3185  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

松上云雀

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】水稻叶片RNA提取问题

最近提取水稻叶片RNA总是发生降解，不知道什么原因。
跑胶图片显示28S条带没有问题，但是18s下边有降解条带。
提取方法是Trizol法提取，材料是水稻叶片。
大家有什么建议呀？
我把提取RNA的步骤写一下
①用液氮将样品研磨至粉末，取0.1g粉末加入预先装有1ml Trizol的离心管中，摇匀。
②2-8℃下12000g离心10min，将RNA的上清液移入1.5ml离心管中。
③在15-30℃下放置5min，加0.2ml氯仿，剧烈振荡15sec，室温下温浴2-3min。2-8℃下，≤12000g离心15min，把水相移入另一1.5ml离心管中。
④加0.5ml氯仿剧烈振荡15sec，室温下温浴2-3min；2-8℃下，≤12000g离心10min，
⑤取上清，加入500ul异丙醇，沉淀10分钟，12000g离心10min

⑥加入1ml 75%乙醇，2-8℃下≤7500g离心5min，小心将上清液倒掉。
⑦将离心管倒扣在吸水纸上5-10min，每管加30μl的DEPC水，可在55-60℃助溶10min。
最后取2ul电泳。
Trizol使用的是Invitrogen的。

[ Last edited by 松上云雀 on 2011-1-26 at 20:01 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-01-25 21:24:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

松上云雀

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by shaquila at 2011-01-26 22:50:09:
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2751909
lz是不是如此图

是的，就是这样的图，只是我同学同样提取水稻叶片的RNA，没有我这种情况，我们材料的区别就是品种不同，生长期不同，不知道是不是这个原因造成的不同结果。
赞一下 回复此楼
10楼2011-01-27 15:11:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

tigertang

木虫 (著名写手)
建议上图，这样大家好分析！
赞一下 回复此楼
2楼2011-01-26 07:43:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

松上云雀

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by tigertang at 2011-01-26 07:43:16:
建议上图，这样大家好分析！

我跑的电泳看了看，没有拍照，直接扔掉了。
跑出来的图片就是18s下边还有多条条带。
赞一下 回复此楼
3楼2011-01-26 10:13:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rioarsenal

金虫 (正式写手)
★ ★
翱宇(金币+2): 谢谢分享经验。 2011-01-26 15:08:26
松上云雀(金币+1): 谢谢，我想问下，你们无菌操作台怎么消毒的呀？就是开一开紫外吗？ 2011-01-26 20:02:14
所有不能干热灭菌的，用DEPC水处理24小时以上，其他一律180度干热灭菌4小时。异丙醇等试剂用新的，无菌操作台认真消毒。。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-01-26 14:32:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化学调剂求助 +8 LULONG1 2026-04-03 8/400 2026-04-06 10:26 by dongzh2009
[考研] 复试调剂 +5 asdasdassda 2026-04-05 5/250 2026-04-06 09:32 by dongzh2009
[考研] 301求调剂 +6 细胞相关蛋白 2026-04-02 10/500 2026-04-06 08:34 by jp9609
[考研] 308求调剂 +4 maverick^_^ 2026-04-03 4/200 2026-04-05 19:08 by 蓝云思雨
[考研] 0832食品科学与工程学硕282调剂 +6 鱼在水中游a 2026-04-02 9/450 2026-04-05 11:45 by flysky1234
[考研] 272求调剂 +4 电气李 2026-04-05 4/200 2026-04-05 10:41 by lbsjt
[考研] 环境285分，过六级，求调剂 +10 xhr12 2026-04-02 10/500 2026-04-04 21:53 by bn53987
[考研] 278求调剂 +3 依旧！ 2026-04-02 4/200 2026-04-04 20:27 by 蓝云思雨
[考研] 0703求调剂 +6 zizimo 2026-03-31 6/300 2026-04-04 14:16 by 无际的草原
[考研] 280求调剂 +21 咕噜晓晓 2026-04-02 22/1100 2026-04-04 11:12 by 猪会飞
[考研] 297求调剂 +11 ljy20040718！ 2026-04-03 13/650 2026-04-04 09:23 by 来看流星雨10
[考研] 273求调剂 +20 李芷新1 2026-03-31 20/1000 2026-04-03 09:58 by linyelide
[考研] 一志愿安徽大学0817化学工程与技术，求调剂 +14 我不是只因 2026-04-02 15/750 2026-04-03 09:49 by 蓝云思雨
[考研] 材料调剂 +4 一样YWY 2026-04-03 4/200 2026-04-03 09:48 by 蓝云思雨
[考研] 重庆大学材料与化工085600，初试370+，求求调剂建议 +8 shzhou_ 2026-04-01 9/450 2026-04-03 09:31 by 蓝云思雨
[考研] 26考研调剂 +4 Wnz.20030617 2026-04-01 5/250 2026-04-02 16:11 by 1939136013狗壮
[考研] 一志愿9初试366 本双非求调剂 +4 运气来得若有似� 2026-04-02 4/200 2026-04-02 09:56 by guanxin1001
[考研] 302求调剂一志愿北航070300，本科郑大化学 +8 圣日耳曼条 2026-04-01 11/550 2026-04-02 07:40 by chemdavid
[考研] 环境工程调剂 +9 hyzzzzzzz. 2026-04-01 9/450 2026-04-01 14:20 by salamander`
[考研] 323分 食品与营养调剂 +3 嘿ooo 2026-03-31 3/150 2026-03-31 09:38 by longlotian
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭