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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 【求助】加了三乙胺的流动相
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terry890

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助】加了三乙胺的流动相

问2个问题，所以给了较多的分哈，我做HPLC的流动相是甲醇：水=20:80加了0.05%的三乙胺，问一，加了三乙胺需要用大量的水冲洗平衡柱子吗？（三乙胺是液态的，不用95%的水冲平衡过渡，液态的不会有析出损害柱子吧）。问二，加了三乙胺的流动相好像不稳定，上了样后大概10多分钟就会出现基线往下走，但没有上样时的基线又是平衡的，不知道是怎么回事，我觉得是三乙胺的影响，原来没有加三乙胺时都没有出现这种情况，请问怎么保持上样后的基线稳定呢？
描述的有点多，谢谢大家！！！
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1楼 2011-01-18 22:37:02
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再顾青城

木虫 (正式写手)
★
terry890(金币+3):谢谢参与
三个金币啊，帮楼主顶起来
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2楼2011-01-18 23:09:22
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求学小子

金虫 (小有名气)
★ ★
terry890(金币+3):谢谢参与
novus(金币+1): 谢谢交流，PS：从楼主色谱条件看应该是走等度的方法哦。 2011-01-19 15:01:29
首先我想说的是，加入0.05%的三乙胺后，流动相是呈强碱性的，最好是测一下流动相的ph值，看一下色谱柱时候能够耐受该ph值，还有关于平衡的问题，最好是从同等比例的水过度到同样比例的盐，这样对色谱柱的寿命会长一点。
还有你应该是用梯度洗脱吧，这样随着梯度进行，基线会波动的，这是很正常的，而且你的波长才234nm，所以波动会比较大。
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3楼2011-01-18 23:27:39
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求学小子

金虫 (小有名气)
防止基线波动的方法可以是：
1 对你要的物质做一个波长扫描，看是否需要那么低的波长，如果可以的话，波长增大一      点
2 流动相的梯度不要太大，尽量放缓一点
3 看能否换成其他的流动相代替
4 平衡的时间尽可能长一点，把基线弄平
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4楼2011-01-18 23:33:50
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meixiaotao

金虫 (初入文坛)
★ ★
terry890(金币+3):谢谢参与
qinhy(金币+1): 多谢回帖交流，欢迎常来药学版！ 2011-01-20 21:13:49
平衡的时候要100%甲醇，50%甲醇，20%甲醇，各平衡一段时间，然后再上含盐流动相，冲柱子的时候，顺序相反，不能用纯水冲柱子！
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5楼2011-01-19 00:02:17
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yangqiang10

金虫 (正式写手)
★
terry890(金币+3):谢谢参与
我也碰到过  老板说是我们公司柱子耐酸 所以才会出现这种情形  不知道是不是这个样子的
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6楼2011-01-19 00:06:54
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mrzouhao

木虫之王 (文坛精英)
★
terry890(金币+3):谢谢参与
你的波长才234nm，所以波动会比较大。平衡时间长些再试试
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7楼2011-01-19 08:14:44
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8814402

至尊木虫 (职业作家)
★ ★
terry890(金币+3):谢谢参与
qinhy(金币+1): 多谢回帖交流，欢迎常来药学版！ 2011-01-20 21:14:19
加点冰醋酸，调节pH也许有可能解决你的第二个问题
第一个问题，回答同2楼
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8楼2011-01-19 08:51:50
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8814402

至尊木虫 (职业作家)
换流动相的平衡过程与关机相反，过程越缓和，越利于柱子寿命
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9楼2011-01-19 08:53:47
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xuedan0628

木虫 (正式写手)
★
terry890(金币+3):谢谢参与
学习啦~~
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10楼2011-01-19 10:01:36
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lichunming106

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
karl2100(金币+1): 谢谢回帖！ 2011-01-19 13:03:54
1.首先，一般色谱柱不能使用纯水进行冲洗，你可以选用10~20%甲醇水进行冲洗或与流动相比例相同流动相（不含盐），再选用80~90%甲醇水进行保存；
2.查询一下，你所使用色谱柱pH范围，一般柱子在强碱性条件下，较易损坏
3.样品溶解可能是不是导致基线波动的因素
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11楼2011-01-19 12:53:56
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terry890

新虫 (小有名气)
novus: 淡定~淡定！ 建议楼主将样品用流动相去溶解，如果基线平衡好了以后再走样品依然有波动（负吸收）的话，可以更换别的波长试一下，或者调整一下检测器的参比波长。 2011-01-20 12:09:34
回答的几乎都没有用，我写的很清楚呀，没有用梯度，用的是
甲醇：水=20:80，！！！ 关于PH值的问题我测过流动相PH值为8，在柱子的酸碱范围！！，还有平衡的问题我也平衡了的！！！平衡了1个小时！！基线都是平衡的没有波动！！就是上了样就波动了！！到底是怎么回事呀？？麻烦了！！
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12楼2011-01-20 11:03:16
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番茄大棚

金虫 (小有名气)
你是在测氨基酸么，
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13楼2011-01-20 17:12:31
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45sally45

银虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
karl2100(金币+1): 谢谢回帖！ 2011-01-25 12:22:31
你说的十几分钟基线向下，是15-17min的吗？如果是的，那在我看来不是基线向下反而是出现倒峰了。你说空走不会出现，进样就会出现，不知你进过流动相和溶剂没，如果没有就试试，如果你的溶剂中有甲醇，那就是溶剂的倒峰的可能就更大了，我有个项目就是甲醇会出倒峰。
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14楼2011-01-24 15:24:27
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蓓蓓3758

铜虫 (小有名气)
??
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15楼2011-01-24 19:43:07
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yaowangdigua

铜虫 (小有名气)
学习了~
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16楼2011-01-26 15:04:13
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