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terry890

新虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 227.3
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虫号: 1028509

[交流] 【求助】加了三乙胺的流动相

问2个问题，所以给了较多的分哈，我做HPLC的流动相是甲醇：水=20:80加了0.05%的三乙胺，问一，加了三乙胺需要用大量的水冲洗平衡柱子吗？（三乙胺是液态的，不用95%的水冲平衡过渡，液态的不会有析出损害柱子吧）。问二，加了三乙胺的流动相好像不稳定，上了样后大概10多分钟就会出现基线往下走，但没有上样时的基线又是平衡的，不知道是怎么回事，我觉得是三乙胺的影响，原来没有加三乙胺时都没有出现这种情况，请问怎么保持上样后的基线稳定呢？
描述的有点多，谢谢大家！！！

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1楼 2011-01-18 22:37:02

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求学小子

金虫 (小有名气)

应助: 3 (幼儿园)
金币: 483.7
帖子: 281
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虫号: 987956

★ ★
terry890(金币+3):谢谢参与
novus(金币+1): 谢谢交流，PS：从楼主色谱条件看应该是走等度的方法哦。 2011-01-19 15:01:29

首先我想说的是，加入0.05%的三乙胺后，流动相是呈强碱性的，最好是测一下流动相的ph值，看一下色谱柱时候能够耐受该ph值，还有关于平衡的问题，最好是从同等比例的水过度到同样比例的盐，这样对色谱柱的寿命会长一点。
还有你应该是用梯度洗脱吧，这样随着梯度进行，基线会波动的，这是很正常的，而且你的波长才234nm，所以波动会比较大。