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terry890

新虫 (小有名气)


[交流] 【求助】加了三乙胺的流动相

问2个问题,所以给了较多的分哈,我做HPLC的流动相是甲醇:水=20:80加了0.05%的三乙胺,问一,加了三乙胺需要用大量的水冲洗平衡柱子吗?(三乙胺是液态的,不用95%的水冲平衡过渡,液态的不会有析出损害柱子吧)。问二,加了三乙胺的流动相好像不稳定,上了样后大概10多分钟就会出现基线往下走,但没有上样时的基线又是平衡的,不知道是怎么回事,我觉得是三乙胺的影响,原来没有加三乙胺时都没有出现这种情况,请问怎么保持上样后的基线稳定呢?
描述的有点多,谢谢大家!!!
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求学小子

金虫 (小有名气)


★ ★
terry890(金币+3):谢谢参与
novus(金币+1): 谢谢交流,PS:从楼主色谱条件看应该是走等度的方法哦。 2011-01-19 15:01:29
首先我想说的是,加入0.05%的三乙胺后,流动相是呈强碱性的,最好是测一下流动相的ph值,看一下色谱柱时候能够耐受该ph值,还有关于平衡的问题,最好是从同等比例的水过度到同样比例的盐,这样对色谱柱的寿命会长一点。
还有你应该是用梯度洗脱吧,这样随着梯度进行,基线会波动的,这是很正常的,而且你的波长才234nm,所以波动会比较大。
3楼2011-01-18 23:27:39
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再顾青城

木虫 (正式写手)



terry890(金币+3):谢谢参与
三个金币啊,帮楼主顶起来
2楼2011-01-18 23:09:22
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求学小子

金虫 (小有名气)


防止基线波动的方法可以是:
1 对你要的物质做一个波长扫描,看是否需要那么低的波长,如果可以的话,波长增大一      点
2 流动相的梯度不要太大,尽量放缓一点
3 看能否换成其他的流动相代替
4 平衡的时间尽可能长一点,把基线弄平
4楼2011-01-18 23:33:50
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meixiaotao

金虫 (初入文坛)


★ ★
terry890(金币+3):谢谢参与
qinhy(金币+1): 多谢回帖交流,欢迎常来药学版! 2011-01-20 21:13:49
平衡的时候要100%甲醇,50%甲醇,20%甲醇,各平衡一段时间,然后再上含盐流动相,冲柱子的时候,顺序相反,不能用纯水冲柱子!
5楼2011-01-19 00:02:17
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