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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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linxi8579

铜虫 (正式写手)


[交流] 【求助/交流】northern实验中的消化

请教一下各位大侠,在文献中叙述小RNA的northern实验设计中,说实验中有杂交后消化和不消化的对照,但是我是northern的外行,不明白northern中杂交后做消化是怎么回事,并且消化的具体操作和目的是什么啊?原文是digested after hybridization.非常感谢啦。
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linxi8579

铜虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by lxjwishes at 2011-01-12 11:14:47:


我是不明白你消化的是什么呢,我是用罗氏的地高辛试剂盒来做的,RNA用手提的可能需要消化DNA,但是试剂盒提出来加了消化步骤的是没有DNA了,不知你是做表达分析还是做检测,做检测还是消化一下,其实就是用DN ...

不过你说的消化应该不是文章中的消化,谢谢你啦。
5楼2011-01-12 18:56:31
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lxjwishes

银虫 (正式写手)



rainwander(金币+1):鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-11 13:01:37
linxi8579(金币+1): 2011-01-11 15:42:13
其实有DNA是没有关系的,可以在跑完变性胶以后切掉DNA部分再转膜就行!
2楼2011-01-11 11:57:17
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linxi8579

铜虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by lxjwishes at 2011-01-11 11:57:17:
其实有DNA是没有关系的,可以在跑完变性胶以后切掉DNA部分再转膜就行!

你说的切掉DNA我明白,但是有没有小的DNA片段啊?还有,你认为文献中说的消化就是消化DNA吗,文章中说杂交后才消化呢?另外根据文章中消化和不消化的比较,不消化的在30nt有带,消化的在20nt有带,这不是可以被切走的东西吧?谢谢赐教啦!
3楼2011-01-11 15:42:02
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lxjwishes

银虫 (正式写手)


northern


rainwander(金币+1):鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-12 11:23:21
linxi8579(金币+2): 2011-01-12 18:55:30
引用回帖:
Originally posted by lxjwishes at 2011-01-11 11:57:17:
其实有DNA是没有关系的,可以在跑完变性胶以后切掉DNA部分再转膜就行!

我是不明白你消化的是什么呢,我是用罗氏的地高辛试剂盒来做的,RNA用手提的可能需要消化DNA,但是试剂盒提出来加了消化步骤的是没有DNA了,不知你是做表达分析还是做检测,做检测还是消化一下,其实就是用DNA酶消化DNA后再抽提,得到的就基本是纯的RNA了。
4楼2011-01-12 11:14:47
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