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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】northern实验中的消化
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linxi8579

铜虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】northern实验中的消化

请教一下各位大侠，在文献中叙述小RNA的northern实验设计中，说实验中有杂交后消化和不消化的对照，但是我是northern的外行，不明白northern中杂交后做消化是怎么回事，并且消化的具体操作和目的是什么啊？原文是digested after hybridization.非常感谢啦。
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1楼 2011-01-10 15:26:49
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lxjwishes

银虫 (正式写手)

northern

★
rainwander(金币+1):鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-12 11:23:21
linxi8579(金币+2): 2011-01-12 18:55:30
引用回帖:
Originally posted by lxjwishes at 2011-01-11 11:57:17:
其实有DNA是没有关系的，可以在跑完变性胶以后切掉DNA部分再转膜就行！

我是不明白你消化的是什么呢，我是用罗氏的地高辛试剂盒来做的，RNA用手提的可能需要消化DNA，但是试剂盒提出来加了消化步骤的是没有DNA了，不知你是做表达分析还是做检测，做检测还是消化一下，其实就是用DNA酶消化DNA后再抽提，得到的就基本是纯的RNA了。
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4楼2011-01-12 11:14:47
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lxjwishes

银虫 (正式写手)
★
rainwander(金币+1):鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-11 13:01:37
linxi8579(金币+1): 2011-01-11 15:42:13
其实有DNA是没有关系的，可以在跑完变性胶以后切掉DNA部分再转膜就行！
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2楼2011-01-11 11:57:17
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linxi8579

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by lxjwishes at 2011-01-11 11:57:17:
其实有DNA是没有关系的，可以在跑完变性胶以后切掉DNA部分再转膜就行！

你说的切掉DNA我明白，但是有没有小的DNA片段啊？还有，你认为文献中说的消化就是消化DNA吗，文章中说杂交后才消化呢？另外根据文章中消化和不消化的比较，不消化的在30nt有带，消化的在20nt有带，这不是可以被切走的东西吧？谢谢赐教啦！
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3楼2011-01-11 15:42:02
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linxi8579

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by lxjwishes at 2011-01-12 11:14:47:


我是不明白你消化的是什么呢，我是用罗氏的地高辛试剂盒来做的，RNA用手提的可能需要消化DNA，但是试剂盒提出来加了消化步骤的是没有DNA了，不知你是做表达分析还是做检测，做检测还是消化一下，其实就是用DN ...

不过你说的消化应该不是文章中的消化，谢谢你啦。
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5楼2011-01-12 18:56:31
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