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[交流]
【求助/交流】关于SOD活性测定中加甲硫氨酸的作用
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在用氮蓝四唑NBT法测定超氧化物歧化酶SOD活性下，加入130mmol/L甲硫氨酸(Met)溶液：称1.9399gMet用磷酸缓冲液定容至100mL 其目的是什么啊？ 为什么要加甲硫氨酸了，看了半天都没发现个道道，还求大虫们赐教。 该试验中，甲硫氨酸是指L-甲硫氨酸还是指DL-甲硫氨酸，两者区别大吗？ [ Last edited by 阿叉 on 2011-3-31 at 12:41 ] |
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 实验技术、方法交流 | 浮萍 |
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dhd997(金币+3):good 2011-01-09 16:38:50
阿叉(金币+1): 2011-01-10 15:36:04
阿叉(金币+1): 2011-03-31 12:37:08
dhd997(金币+3):good 2011-01-09 16:38:50
阿叉(金币+1): 2011-01-10 15:36:04
阿叉(金币+1): 2011-03-31 12:37:08
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从该方法原理上可解释这个问题： 该方法依据超氧物歧化酶抑制氮蓝四唑（NBT）在光下的还原作用来确定酶活性大小。在氧气中，还原的核黄素与氧反应产生O2-，O2-将无色(或微黄)的氮蓝四唑还原为蓝色，SOD通过催化O2-歧化反应，生成O2与H2O2，从而抑制蓝色形成。于是光还原反应后，反应液蓝色愈深，说明酶活性愈低，反之酶活性愈高。 核黄素发生还原反应，需要体系中提供一定的电子供体，而甲硫氨酸就起到了这个电子供体作用，使得核黄素的光激发还原反应得以进行。 |
2楼2011-01-09 15:49:33
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