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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于SOD活性测定中加甲硫氨酸的作用
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阿叉

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于SOD活性测定中加甲硫氨酸的作用

在用氮蓝四唑NBT法测定超氧化物歧化酶SOD活性下，加入130mmol/L甲硫氨酸(Met)溶液：称1.9399gMet用磷酸缓冲液定容至100mL
其目的是什么啊？
为什么要加甲硫氨酸了，看了半天都没发现个道道，还求大虫们赐教。

该试验中，甲硫氨酸是指L-甲硫氨酸还是指DL-甲硫氨酸，两者区别大吗？

[ Last edited by 阿叉 on 2011-3-31 at 12:41 ]
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1楼 2011-01-08 13:52:59
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
19楼: Originally posted by Miss木子 at 2014-09-15 20:09:45
我列的第二种方法是李合生那本植物生理生化试验原理和技术这本书上的...

我不敢下定论书上一定是错的，但根据这个浓度比例，应该参考的是Constantine N. Giannopolitis and Stanley K. Ries在1977年发表的文章
Constantine N. Giannopolitis and Stanley K. Ries
Superoxide Dismutases
I. Occurrence in Higher Plants
Plant Physiology February 1977 vol. 59 no. 2 309-314
浓度只有书上这个配方的十分之一
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20楼2014-09-16 01:11:42
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
★ ★ ★
dhd997(金币+3):good 2011-01-09 16:38:50
阿叉(金币+1): 2011-01-10 15:36:04
阿叉(金币+1): 2011-03-31 12:37:08
从该方法原理上可解释这个问题：
该方法依据超氧物歧化酶抑制氮蓝四唑（NBT）在光下的还原作用来确定酶活性大小。在氧气中，还原的核黄素与氧反应产生O2-，O2-将无色(或微黄)的氮蓝四唑还原为蓝色，SOD通过催化O2-歧化反应，生成O2与H2O2，从而抑制蓝色形成。于是光还原反应后，反应液蓝色愈深，说明酶活性愈低，反之酶活性愈高。
核黄素发生还原反应，需要体系中提供一定的电子供体，而甲硫氨酸就起到了这个电子供体作用，使得核黄素的光激发还原反应得以进行。
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2楼2011-01-09 15:49:33
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阿叉

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by starseacow at 2011-01-09 15:49:33:
从该方法原理上可解释这个问题：
该方法依据超氧物歧化酶抑制氮蓝四唑（NBT）在光下的还原作用来确定酶活性大小。在氧气中，还原的核黄素与氧反应产生O2-，O2-将无色(或微黄)的氮蓝四唑还原为蓝色，SOD通过催化O ...

懂了，那请问能不能说甲硫氨酸是还原剂？
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3楼2011-01-10 15:39:09
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
阿叉(金币+1): 2011-01-10 18:27:09
我觉得可以这么讲
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4楼2011-01-10 15:43:35
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阿叉9楼
2011-03-31 18:45   回复  
引用回帖:
Originally posted by starseacow at 2011-03-31 13:39:46: 不清楚L与DL的区别是否影响实验。我在测定中使用的是L-甲硫氨酸

哦
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