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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】P不出正确条带
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asdfghjkl-00

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】P不出正确条带

我设计的引物是900的，但是在750出来了一个，500出来了一个，我P 了好几次，否没有得到正确条带，请问是怎么回事啊？是反映条件的问题还是引物问题？如果是反映条件的问题，该如何改进？如果是引物的问题，有没有什么办法可以验证引物的正确性啊？
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1楼 2011-01-08 11:13:50
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real339

金虫 (正式写手)
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1949stone(金币+1):有的的确是 2011-01-09 20:25:20
非特异结合的可能比较大。还有就是你的染色剂是EB吗？目前有的替代品很差的，能使条带位置差上个100-200bp。
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9楼2011-01-09 11:52:26
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real339

金虫 (正式写手)
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引用回帖:
Originally posted by real339 at 2011-01-09 11:52:26:
非特异结合的可能比较大。还有就是你的染色剂是EB吗？目前有的替代品很差的，能使条带位置差上个100-200bp。

多设计几对引物试试吧，实在不行就把你的片段测序，分析一下片段是不是你想要的基因或目的片段的一部分
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11楼2011-01-09 15:05:09
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real339

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
亲身经历过啊，后来同样的产物换EB，一次就OK了。
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15楼2011-01-09 18:19:39
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