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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 【求助/交流】基因克隆实验设计
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张晓梅ZXM

金虫 (正式写手)

meimeizhang

[交流] 【求助/交流】基因克隆实验设计 已有5人参与

假设某种微生物能以某蛋白酶浸染昆虫，请设计2种方法克隆编码该蛋白酶的基因：
1，该微生物的遗传背景不清楚
2，该微生物的遗传背景清楚
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每天进步一点点，持之以恒！
1楼 2011-01-04 13:39:13
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+2):很详细啊~~~鼓励积极参与~~~ 2011-01-04 16:00:44
1，该微生物的遗传背景不清楚
方法一分离该蛋白，C/N端测序，设计兼并引物，PCR克隆编码该蛋白酶的基因。方法二、构建DNA文库，筛选并克隆编码该蛋白酶的基因。
2，该微生物的遗传背景清楚
PCR
这是一般方法，看看其他虫友有什么更好的方法。
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2楼2011-01-04 14:04:38
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+2):鼓励积极参与~~~ 2011-01-04 16:00:52
1，该微生物的遗传背景不清楚：分离蛋白，测序，可以推出基因序列，其实和楼上说的差不多！
2，该微生物的遗传背景清楚：测序，扩增，验证!
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼2011-01-04 14:53:59
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张晓梅ZXM

金虫 (正式写手)

meimeizhang
引用回帖:
Originally posted by lxj341401 at 2011-01-04 14:04:38:
1，该微生物的遗传背景不清楚
方法一分离该蛋白，C/N端测序，设计兼并引物，PCR克隆编码该蛋白酶的基因。方法二、构建DNA文库，筛选并克隆编码该蛋白酶的基因。
2，该微生物的遗传背景清楚
PCR
这是一般方法， ...

谢谢！因为是新手，我还想再请教一下，该微生物的遗传背景是否清楚对这个问题的出发点有什么不一样？
嘿嘿，谢谢你哈
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每天进步一点点，持之以恒！
4楼2011-01-04 16:24:53
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-02-20 23:05:37
引用回帖:
Originally posted by 张晓梅ZXM at 2011-01-04 16:24:53:



谢谢！因为是新手，我还想再请教一下，该微生物的遗传背景是否清楚对这个问题的出发点有什么不一样？
嘿嘿，谢谢你哈

清楚微生物的遗传背景，说明已知要克隆的序列。
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5楼2011-01-04 16:38:19
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conanlp

银虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

楼上均是牛人~菜鸟这厢受教了~~
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6楼2011-02-20 18:23:31
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linda_0209

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 张晓梅ZXM at 2011-01-04 16:24:53
谢谢！因为是新手，我还想再请教一下，该微生物的遗传背景是否清楚对这个问题的出发点有什么不一样？
嘿嘿，谢谢你哈...

关键如何能分离到该蛋白酶？
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7楼2015-03-10 15:05:46
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