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【求助/交流】双酶切切不动
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我分别用TOYOBO和Fermentas的限制性内切酶做酶切反应，都切不开，是怎么回事啊？ ps:这个质粒是个重组体，我现在需要把上面的目的片段切下来，目的片段的大小约为670bp 我的对照设置得不好，缺少重组质粒不酶切的对照。以至于让虫友误认为我想得到pcDNA3.0上的片段了。实际上，我想得到的重组体上的目的基因片段。大概670bp。 质粒浓度 205ug/ml OD260/280=1.90 TOYOBO 体系 10ul DNA(0.2ug/ul) 4ul 水 4ul Buffer(10*) 1ul BamH I 0.5ul Xho I 0.5ul _____________________ 37℃ 6个小时 Fermentas 体系 10ul DNA(0.2ug/ul) 4ul 水 2.5ul Tango Buffer(10*) 2ul (工作浓度为2*） BamH I 1ul （要求Bam H I 为2倍） Xho I 0.5ul _____________________ 37℃ 3个小时 以下是酶切结果图片 TOYOBO:  Fermentas:  [ Last edited by ikaren2013 on 2010-12-27 at 21:19 ] |
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