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【求助/交流】BL21(DE3) 在M9中发生自溶
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| 最近在做蛋白的标记,用的是BL21(DE3),开始用4mlLB摇菌摇浓,然后转1ml到70mlM9中扩大,最后转入700 ML M9中再放大并诱导表达。做的过程中发现,细菌在LB中生长稳定,转入小体积M9中和大体积M9中会发生自溶现象!有时候在70ml中自溶,有时候在大瓶中自溶。具体表现为,细菌OD长不上去。最近两次,一次在大瓶中,小瓶子摇浓后,转入大瓶中,OD长到0.5就上不去,然后菌体溶解;另一次是1ml转入小瓶中,摇过夜早上过来发现出现同样的问题。同实验室的人,有将种子按相同条件接入M9中,结果一瓶自溶,一瓶能正常生长。因为做标记,不可以使用M9+LB混合培养基,以及添加额外的碳源和氮源。求高手解答! |
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