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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】消除质粒
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wangdandelia

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】消除质粒 已有2人参与

请问有没有人做过消除质粒的实验啊？我想把大肠杆菌的一个质粒消除，然后作感受态细胞，传代培养很多代了，可是还是没有消除。大家有没有什么好的办法呢？
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1楼 2010-12-20 10:16:04
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

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dhd997(金币+3):good 2010-12-20 15:48:39
呵呵，实验室的一个师姐曾经用 核酸研究 上的一篇老文献上的方法消除的，一次成功。

Curing of a plasmid from E.coli using high-voltage electroporation

全文链接：

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/ ... f/nar00140-0609.pdf
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2010-12-20 11:21:10
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wangdandelia

木虫 (正式写手)
★
silicare(金币+1):反馈有奖 2010-12-22 12:22:26
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2010-12-20 11:21:10:
呵呵，实验室的一个师姐曾经用 核酸研究 上的一篇老文献上的方法消除的，一次成功。

Curing of a plasmid from E.coli using high-voltage electroporation

全文链接：

[url]http://www.ncbi.nlm.nih.go ...

谢谢你！我明天试试看！
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3楼2010-12-20 17:26:32
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wangdandelia

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2010-12-20 11:21:10:
呵呵，实验室的一个师姐曾经用 核酸研究 上的一篇老文献上的方法消除的，一次成功。

Curing of a plasmid from E.coli using high-voltage electroporation

全文链接：

[url]http://www.ncbi.nlm.nih.go ...

请问你们是如何电击呢？把菌收集清洗之后，直接把菌体放入电击杯中吗?是不是应该避免染菌呢？
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4楼2010-12-21 08:56:34
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

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恩，是的。点击杯用之前用医用酒精浸泡数小时，然后用无菌双蒸水冲洗数次。
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5楼2010-12-21 09:57:19
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brightfuture01

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Originally posted by wangdandelia at 2010-12-21 08:56:34:

请问你们是如何电击呢？把菌收集清洗之后，直接把菌体放入电击杯中吗?是不是应该避免染菌呢？

忘记引用你的了。

恩，是的。点击杯用之前用医用酒精浸泡数小时，然后用无菌双蒸水冲洗数次。
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6楼2010-12-21 09:57:49
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wangdandelia

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2010-12-21 09:57:49:



忘记引用你的了。

恩，是的。点击杯用之前用医用酒精浸泡数小时，然后用无菌双蒸水冲洗数次。

恩，好的，谢谢你！我今天做了，在等待结果~
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7楼2010-12-21 21:36:08
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brightfuture01

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引用回帖:
Originally posted by wangdandelia at 2010-12-21 21:36:08:


恩，好的，谢谢你！我今天做了，在等待结果~

呵呵，祝好运哦。
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8楼2010-12-21 21:38:10
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wangdandelia

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2010-12-21 21:38:10:



呵呵，祝好运哦。

谢谢！
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9楼2010-12-21 21:55:50
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