24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 3673  |  回复: 16
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

chendarid0

银虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】提血液RNA浓度很低,怎样使其浓度高从而用于反转录 已有8人参与

请高手出手相救啊
提取血液RNA的浓度很低,用于下面的20ul反转录体系(最大的rna量不能超过1ug),我是900ng的rna来反转录,提取rna浓度太低,加入的rna体积会超过20ul体系,怎么办。
我也尝试过将2管获得的血液组织合并成一管,离心去上清,取下面的(应该含有很多血细胞),然后加1ml trizol提取rna,可是还是很低。
如果血液不离心的话那么我们用的一般的ep管里就盛不下1mltrizol和血液了,那如果血液很多,trizol很少(小于1ul)的话可能也提不好吧。
可不可以找一个大一点的ep管,然后将几管的血液合并在这个管子里,然后再加适量trizol来提取rna。
请各位高手哥哥姐姐指点一二,小弟不尽感激。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

三人行必有我师
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

宁夏8083

铁杆木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+2):谢谢交流 2010-12-21 08:29:00
你提的是全血RNA?可是一般的都是替PBMC或白细胞的RNA啊。要是这样的话,你可以把红细胞裂解以后将白细胞收集到一个EP管中再提,Trizol的量不能太少,否则会影响RNA的提取效率的。如果是提取血浆中的病毒RNA,那你可以将血浆或血清单分出来再提啊。另外,象楼上所说,不要太计较总量的,因为还有反转录的步骤,所得产物足够你用了,还有就是找一个较高转录效率的反转录酶也就OK了
9楼2010-12-20 19:38:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 17 个回答

randomqd

木虫 (小有名气)

樱花骑士

建议

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
silicare(金币+1):浓缩是一个方法 2010-12-21 11:46:37
多提几管之后用乙醇沉淀,加少量水溶解
未来天空才是极限
2楼2010-12-19 19:39:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chendarid0

银虫 (初入文坛)

多谢回复,请看我的思路可行否

引用回帖:
Originally posted by randomqd at 2010-12-19 19:39:47:
多提几管之后用乙醇沉淀,加少量水溶解

我 的血液组织材料较少,分成好几管来提肯定会损失很多。我可以找一个大的ep管如2ml,把几管血液材料都并在这一个管里,只加很少的trizol来提取,这样就会损失少一些,可以吗?请问trizol加入少量如0.2ul,可以吧,谢谢 ,请指教
三人行必有我师
3楼2010-12-20 10:15:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

randomqd

木虫 (小有名气)

樱花骑士

TRIZOL太少

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):鼓励交流 2010-12-20 15:42:00
RNA提的质量应该不好。RT对RNA质量要求还是挺高的
未来天空才是极限
4楼2010-12-20 14:07:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 295分求调剂 +12 ?要上岸? 2026-04-10 12/600 2026-04-12 12:49 by 学zh
[考研] 308求调剂 +5 VvvvL 2026-04-10 5/250 2026-04-12 10:17 by babysonlkd
[考研] 326求调剂 +6 Shansyn 2026-04-10 6/300 2026-04-12 09:46 by hammer3
[考研] 305求调剂 +6 77Qi 2026-04-07 6/300 2026-04-12 02:30 by 秋豆菜芽
[考研] 331求调剂 +5 王国帅 2026-04-11 5/250 2026-04-11 22:56 by 溪涧流水
[考研] 291分调剂 +5 上岸小莹加油 2026-04-09 6/300 2026-04-11 21:06 by 逆水乘风
[考研] 303求调剂 +14 SereinQ 2026-04-10 15/750 2026-04-11 20:43 by 蓝云思雨
[考研] 电子信息279求调剂,有书读就行 +8 wwwooden 2026-04-08 11/550 2026-04-11 20:22 by cq2548
[考研] 一志愿085502,267分求调剂 +11 再忙也要吃饭啊 2026-04-08 12/600 2026-04-11 11:08 by zhq0425
[考研] 广东省 085601 329分求调剂 +14 Eddieddd 2026-04-10 14/700 2026-04-11 09:58 by bljnqdcc
[考研] 22408调剂求助 +7 毂12 2026-04-09 9/450 2026-04-11 09:23 by 哦哦123
[考研] 284求调剂 +9 让我上岸吧阿西 2026-04-09 11/550 2026-04-10 19:18 by 靖jing
[考研] 材料专业344求调剂 +16 hualkop 2026-04-10 21/1050 2026-04-10 17:28 by laoshidan
[考研] 0856专硕求调剂 希望是a区院校 +21 好好休息好不好 2026-04-09 24/1200 2026-04-10 16:58 by luoyongfeng
[考研] 本9 一志愿西工大085601 324求调剂 +5 wysyjs25 2026-04-10 5/250 2026-04-10 16:57 by luoyongfeng
[考研] 282,电气工程专业,求调剂,不挑专业 +9 jggshjkkm 2026-04-10 9/450 2026-04-10 14:55 by 逆水乘风
[考研] 材料工程调剂 +12 小刘同学吖吖 2026-04-06 13/650 2026-04-09 17:07 by luoyongfeng
[考研] 机械专硕273请求调剂 +6 庚申壬申 2026-04-07 6/300 2026-04-08 22:41 by bljnqdcc
[考研] 求调剂 +10 chenxrlkx 2026-04-05 10/500 2026-04-06 11:31 by 猪会飞
[考研] 296求调剂 +3 汪!?! 2026-04-05 4/200 2026-04-05 20:13 by 啵啵啵0119
信息提示
请填处理意见