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feiye2214

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】引物设计信息如此,touchdownPCR如何设计? 已有3人参与


这是设计的引物的详细参数,1kb的大小,Tm63左右,如何设计touchdown-PCR,因为之前跑过温度梯度,好像出现了1000bp的条带,但是还有许多短杂带,想用TD PCR来扩增特异性条带
PS:这个是根据已知物种的序列,设计未知物种的同源序列的PCR引物

各位,如何设计?
  


起始温度是不是应该高于65啦?从68度如何?每循环降低0.5度,直到62?然后62度持续?

做过TD PCR的给小弟指点指点。。。
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feiye2214

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-12-16 22:12:19:
我估计第一个温度可以直接上70度了,然后每一个循环降半度

杂带不怕,挖出目的条带克隆了测序,再设计引物P过~

上70度,下是62度?还是更低点?
6楼2010-12-16 22:23:46
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