应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】为什么在浓缩胶的时候漏？
241/3返回列表123下一页
查看: 3958  |  回复: 23
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

414941613

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】为什么在浓缩胶的时候漏？ 已有9人参与

大家好，我的实验遇到了些问题。
我跑的是垂直的SDS-PAGE，加入梳子后两个半小时拔梳子。每个孔10 μL样品。
样品在跑浓缩胶的时候容易漏，跑一会明显的看到 loading buffer 向下漏，几条细线似地，漏到与分离胶的分界线位置。我疯了。谢谢大家的解答
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

蛋白相关 蛋白电泳 漏样

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-12-13 22:02:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

daringhong

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流 2010-12-15 10:43:34
你制胶的时候，等分离胶凝好后有没有把上层的水吸干？
要把那部分液体吸干后再在上面制浓缩胶的。否则两层胶中间会有不凝固的液体，影响效果。
赞一下(2人) 回复此楼
每天进步一点点~~
2楼2010-12-13 22:30:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 414941613 at 2010-12-13 22:02:22:
大家好，我的实验遇到了些问题。
我跑的是垂直的SDS-PAGE，加入梳子后两个半小时拔梳子。每个孔10 μL样品。
样品在跑浓缩胶的时候容易漏，跑一会明显的看到 loading buffer 向下漏，几条细线似地，漏到与分离胶 ...

正如楼上说的，呵呵。不过有个trick就是压胶的时候不用水，而用1%的SDS，这样倒浓缩胶的时候就不用滤纸条吸干了，只要倒尽就OK了，这样一定会凝在一起的。
赞一下(1人) 回复此楼
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
3楼2010-12-13 22:35:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

414941613

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by daringhong at 2010-12-13 22:30:32:
你制胶的时候，等分离胶凝好后有没有把上层的水吸干？
要把那部分液体吸干后再在上面制浓缩胶的。否则两层胶中间会有不凝固的液体，影响效果。

首先谢谢你的解答。我的样品在刚出孔一会就有蓝色的buffer 向下漏，还没有到分界线的位置，而且实验室的其它人也是这样做的，却没有出现我这样的情况。我这种情况感觉是胶的内部有细小的缝隙。
赞一下 回复此楼
4楼2010-12-13 23:08:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

414941613

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2010-12-13 22:35:04:



正如楼上说的，呵呵。不过有个trick就是压胶的时候不用水，而用1%的SDS，这样倒浓缩胶的时候就不用滤纸条吸干了，只要倒尽就OK了，这样一定会凝在一起的。

谢谢你的解答和建议。我以前的压胶是用水或者是异丁醇，实验室的人都用水压胶的，他们都没有出现这种情况，只有我的出现。
赞一下 回复此楼
5楼2010-12-13 23:13:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 414941613 at 2010-12-13 23:13:04:

谢谢你的解答和建议。我以前的压胶是用水或者是异丁醇，实验室的人都用水压胶的，他们都没有出现这种情况，只有我的出现。

你拿别人配好的胶试试看还有这样的情况发生么。
赞一下(1人) 回复此楼
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
6楼2010-12-13 23:16:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

414941613

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2010-12-13 23:16:53:



你拿别人配好的胶试试看还有这样的情况发生么。

我一个师兄下午也跑SDS，我看看他的操作过程吧。谢谢你。
赞一下 回复此楼
7楼2010-12-14 08:47:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):热心鼓励 2010-12-15 10:43:54
引用回帖:
Originally posted by 414941613 at 2010-12-14 08:47:44:

我一个师兄下午也跑SDS，我看看他的操作过程吧。谢谢你。

操作过程应该没有什么问题，你用他配的一块儿胶看看是不是你配胶的问题。先排除了这个问题再看是不是你操作的问题，
赞一下(2人) 回复此楼
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
8楼2010-12-14 08:49:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

414941613

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2010-12-14 08:49:53:



操作过程应该没有什么问题，你用他配的一块儿胶看看是不是你配胶的问题。先排除了这个问题再看是不是你操作的问题，

这倒也是，我看看。
回复此楼
9楼2010-12-14 12:23:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

相逢
10楼2010-12-14 12:39:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 414941613 的主题更新
241/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭