| 查看: 3288 | 回复: 14 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
wangdandelia木虫 (正式写手)
|
[交流]
【求助/交流】质粒片段丢失问题 已有6人参与
|
||
|
各位虫友，我想请教一下，你们有没有遇到质粒转到感受态细胞后，会丢失片段的问题？ 我最近遇到了一个问题，就是将质粒切开，人工插入一个片段，再连接后，转化到感受态细胞中，结果得到的新的质粒丢失了一个很大的片段，不知道这是什么原因，欢迎各位虫友来讨论一下！我用的是一个含有转座子的自杀质粒，pRL27。但是在受体菌中是可以稳定存在的。 我查找资料，至今还没有找到相关的原因。可能是感受态细胞出了问题，现在正准备把原质粒的菌体通过没有抗性的LB培养基传代培养，从而筛选一个完全丢失质粒的受体菌，不知道这个方法可行不可行，需要注意什么问题。 我做个对照试验，就是把提好的质粒不任何处理，再次转入感受态细胞中，然后从转化子中提取质粒，突然发现质粒条带还有，但是质粒条带下方莫名其妙地多了一个条带，请问这怎么解释呢？是不是感受态细胞污染了呢？ [ Last edited by wangdandelia on 2010-12-19 at 11:10 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有98人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 构建好的质粒如何防止丢失
已经有12人回复
- 质粒稳定性的问题
已经有8人回复
- 129bp小片段从pGEM-T上酶切回收的问题
已经有13人回复
- 求助：关于重组质粒目的条带丢失
已经有9人回复
- 自杀质粒
已经有7人回复
- 质粒片段丢失问题
已经有3人回复
- 【求助/交流】质粒的不相容性
已经有7人回复
- 【求助/交流】质粒跟目的基因连接不上怎么办
已经有17人回复
- 【求助/交流】基因敲除问题
已经有5人回复
gundamba
木虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2450.3
- 散金: 236
- 帖子: 225
- 在线: 40.8小时
- 虫号: 736032
- 注册: 2009-03-31
- 性别: GG
- 专业: 细胞信号转导
7楼2010-12-20 19:37:56
gundamba
木虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2450.3
- 散金: 236
- 帖子: 225
- 在线: 40.8小时
- 虫号: 736032
- 注册: 2009-03-31
- 性别: GG
- 专业: 细胞信号转导
2楼2010-12-14 23:04:45
3楼2010-12-14 23:25:05
gongeleven
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 55 (初中生)
- 金币: 7107.8
- 散金: 222
- 红花: 3
- 帖子: 432
- 在线: 152.9小时
- 虫号: 1082982
- 注册: 2010-08-27
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
4楼2010-12-15 09:07:37
