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guoxingjun2008

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[交流] 【求助/交流】ELISA实验的困惑？已有10人参与

我在用GBD的ELISA试剂盒做实验，标准曲线浓度高的OD反而比浓度低的OD值要大，所以很郁闷。而在样品中，0.05mg/ml的OD为0.893,但是0.1mg/ml的OD却只为0.726，不知道原因出在哪里？
我加样过程中有几个孔出现了气泡，而且洗涤的时候用的是排枪，估计各个孔加入洗液的体积可能也有差异？
请问，这些是不是造成这次ELISA实验数据混乱的原因呢？
做ELISA过程中还需要注意哪些问题？

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1楼 2010-12-12 15:33:29

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guoxingjun2008

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引用回帖:

Originally posted by dannel025 at 2010-12-13 09:46:36:
加样尽量不要有气泡，有的话用枪捅一捅就破了。除了洗板尽量不要用排枪，除非你可以保证你排枪和枪头足够好，每次吸液量都相同。
给点建议就是适当增加洗板次数，很多时候数据紊乱就是因为没洗干净而造成背景太深。

但是样品比较多，如果不用排枪的话，加样的间隔时间就比较长了，不知道这样对结果的影响大不大？