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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 【求助】ELISA稳定性
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pingdiguo

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】ELISA稳定性 已有3人参与

做了半年ELISA了，自觉已经很熟悉了，可是为什么我做实验没有重复性呢？
棋盘法找的点在同样做就重复不出来了，不是显色值过高就是没有颜色，好苦恼啊，不知道为什么？求高手指教！！

[ Last edited by pingdiguo on 2010-9-12 at 07:35 ]
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You never know how strong you really are, until being strong is the only choice you have.
1楼 2010-09-12 07:23:20
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richujs

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
冰雪灵魂(金币+1):谢谢回帖交流，欢迎常来食品板块~~ 2010-09-12 17:04:04
注意一下反应条件的一致性，显色时间，显色液加入时的温度等等
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思想是能力和力量的源泉
2楼2010-09-12 15:24:22
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pingdiguo

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by richujs at 2010-09-12 15:24:22:
注意一下反应条件的一致性，显色时间，显色液加入时的温度等等

反应条件上都注意了，想问下板子包被封闭完毕后，放在四度冰箱中存放，这个存放的时间可能会有一两天的不同，会导致这样大的差异么？洗板的时候放置时间有几分钟的差异可能会导致这么大的差异么？
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You never know how strong you really are, until being strong is the only choice you have.
3楼2010-09-12 21:24:29
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richujs

木虫 (正式写手)
★ ★
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冰雪灵魂(金币+1):谢谢回帖交流，欢迎常来食品板块~~ 2010-09-13 07:26:56
如果没有做过稳定性的试验，在四度放的时间不要太长。
一般不会有太大的差异。
可以按照试验的顺序，按个排查
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思想是能力和力量的源泉
4楼2010-09-12 22:00:16
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pingdiguo

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by richujs at 2010-09-12 22:00:16:
如果没有做过稳定性的试验，在四度放的时间不要太长。
一般不会有太大的差异。
可以按照试验的顺序，按个排查

谢谢，哎。。。还是要大量的不知道有没有意义的实验。。。
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You never know how strong you really are, until being strong is the only choice you have.
5楼2010-09-13 18:39:35
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richujs

木虫 (正式写手)
★
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这实验就这样，我当时就因为二抗的问题，耽误了三四个月的时间。所以做实验的时候，尤其是排除实验，一定要有系统性，还要注意分析数据，避免重复无意义的实验
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思想是能力和力量的源泉
6楼2010-09-13 20:50:42
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ty10086

捐助贵宾 (小有名气)
★
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楼主你做的还不够仔细，继续做吧，建议从以下方面继续优化，缓冲液、时间控制、37度烘烤。。。。。。
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7楼2010-12-07 15:02:09
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