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guoxingjun2008

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】ELISA实验的困惑?已有10人参与

我在用GBD的ELISA试剂盒做实验,标准曲线浓度高的OD反而比浓度低的OD值要大,所以很郁闷。而在样品中,0.05mg/ml的OD为0.893,但是0.1mg/ml的OD却只为0.726,不知道原因出在哪里?
   我加样过程中有几个孔出现了气泡,而且洗涤的时候用的是排枪,估计各个孔加入洗液的体积可能也有差异?
   请问,这些是不是造成这次ELISA实验数据混乱的原因呢?
   做ELISA过程中还需要注意哪些问题?
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rhy1027

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
可能原因:1.你最后一个点有没有沉淀?不过你OD整体都比较低,应该排除这种可能;2.你考虑过边缘效应吗?往往第一个点和最后一个点会出现这样的问题!所以有条件的话,最好用洗板机;3. 背景。如果你的Blocking buffer用的不好的话,也可能出现这个现象。可以适当的加大Block强度,例如用Commercial的Chemical Blocking Buffer,或者2-5%Milk inPBST。希望能帮到你! 
11楼2010-12-13 18:13:57
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