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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】ELISA实验的困惑？
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guoxingjun2008

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】ELISA实验的困惑？ 已有10人参与

我在用GBD的ELISA试剂盒做实验，标准曲线浓度高的OD反而比浓度低的OD值要大，所以很郁闷。而在样品中，0.05mg/ml的OD为0.893,但是0.1mg/ml的OD却只为0.726，不知道原因出在哪里？
   我加样过程中有几个孔出现了气泡，而且洗涤的时候用的是排枪，估计各个孔加入洗液的体积可能也有差异？
   请问，这些是不是造成这次ELISA实验数据混乱的原因呢？
   做ELISA过程中还需要注意哪些问题？
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1楼 2010-12-12 15:33:29
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rhy1027

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可能原因：1.你最后一个点有没有沉淀？不过你OD整体都比较低，应该排除这种可能；2.你考虑过边缘效应吗？往往第一个点和最后一个点会出现这样的问题！所以有条件的话，最好用洗板机；3. 背景。如果你的Blocking buffer用的不好的话，也可能出现这个现象。可以适当的加大Block强度，例如用Commercial的Chemical Blocking Buffer，或者2-5%Milk inＰＢＳＴ。希望能帮到你！　
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11楼2010-12-13 18:13:57
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richujs

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1):鼓励积极参与~~~ 2010-12-13 00:26:07
有气泡影响比较大。洗板的话，用排枪是可以的。不知道你用的盒子是测什么的
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思想是能力和力量的源泉
2楼2010-12-12 20:34:08
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guoxingjun2008

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by richujs at 2010-12-12 20:34:08:
有气泡影响比较大。洗板的话，用排枪是可以的。不知道你用的盒子是测什么的

测单链DNA！
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3楼2010-12-13 08:26:04
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skkyy88888

铜虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可能跟你的盒子也有关系，我有一次也是买个盒子做不出标曲。
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4楼2010-12-13 09:31:45
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