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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】分离培养后如何判断是纯菌？
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ycj0746

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】分离培养后如何判断是纯菌？ 已有13人参与

分离培养后如何判断是纯菌？直接将菌液送检测序通常测序出来含有杂合体或者说是菌液不纯，反复划线挑单菌后镜检形态均一致，但就是测序测不出来。如何判断纯或不纯啊？有没准确点的指标，而不是说眼睛看就行。
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1楼 2010-12-11 17:36:46
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xuanxuankaoyan

至尊木虫 (知名作家)
直接菌液PCR看条带
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2楼2010-12-11 18:31:09
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yangjun130

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+2):鼓励积极参与~~~ 2010-12-12 13:59:21
可以用稀释涂布的方法，多涂布几次，然后挑选你要的菌落划线在富集培养，若仍不存，可重复多次，直至纯化
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3楼2010-12-12 08:57:46
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girlfisher

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
测序测不出是说有杂信号还是没信号还是其他原因?
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4楼2010-12-12 10:42:58
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柚柚海风

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我们一般都是镜检  呵呵 测序还没有上呢
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5楼2010-12-12 20:17:31
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hampc

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
转种于血平板上及其他选择性培养基上，从菌落形态上一般能看出来，最好的办法是接种到显色培养基上，就更明显了。
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6楼2010-12-12 20:48:35
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鬼豆虫

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
镜检呀。 一般都镜检。 镜检就很准了。
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君子见机，达人知命
7楼2010-12-12 21:21:53
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ycj0746

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by xuanxuankaoyan at 2010-12-11 18:31:09:
直接菌液PCR看条带

如何看？ PCR扩出来的都是相同长度的片段，琼脂糖胶上反映出来的都是同一个位置，只有在测序的时候才能显示纯或者不纯。
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8楼2010-12-19 18:58:26
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ycj0746

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yangjun130 at 2010-12-12 08:57:46:
可以用稀释涂布的方法，多涂布几次，然后挑选你要的菌落划线在富集培养，若仍不存，可重复多次，直至纯化

我也知道反复纯化，但是我的问题是如何判断是否已经纯了？
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9楼2010-12-19 19:00:12
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ycj0746

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by girlfisher at 2010-12-12 10:42:58:
测序测不出是说有杂信号还是没信号还是其他原因?

是杂合体存在或者模板不纯的原因。
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10楼2010-12-19 19:01:22
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