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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】ELISA实验中的问题
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guoxingjun2008

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】ELISA实验中的问题 已有4人参与

各位虫友，初涉ELISA领域，很多地方不明白，有两个问题要向大家请教：
  第一，wash solution× 100，是不是要稀释100倍，即1ml洗液加99ml蒸馏水混合后使用？
  第二，我要用ELISA来检测我的样品中是否有目标物质，如果，如果，实际上在我的样品中没有这种目标物质，那最后样品的吸光度是不是和空白对照一样，都为0啊？
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1楼 2010-12-03 09:04:35
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aga0110125

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
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dhd997(金币+2):good 2010-12-03 10:14:28
稀释100倍按常规一般标识为100×，当然也不排除有你那种标识的
如果，实际的样品中没有目标物质，理论上后样品的吸光度是和空白对照一样，都为0，但是实际很难做到这一点，有一定程度的上下浮动，视具体操作而定
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2楼2010-12-03 09:57:53
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guoxingjun2008

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by aga0110125 at 2010-12-03 09:57:53:
稀释100倍按常规一般标识为100×，当然也不排除有你那种标识的
如果，实际的样品中没有目标物质，理论上后样品的吸光度是和空白对照一样，都为0，但是实际很难做到这一点，有一定程度的上下浮动，视具体操作而定

对了，我这个试剂盒是把样品和酶液都加完后，37°温育1小时，然后再洗板3-5次，之后就是加底物和终止液。而有很多试剂盒都是加完样品，洗板3次，然后加酶液后又洗板3次。
  这个加样完毕后的总洗板和分别加样后分别洗板有什么差别吗？
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3楼2010-12-03 11:14:40
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aga0110125

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
不同厂家原理不同啦，这个就不好说了
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4楼2010-12-06 08:58:15
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hujinling0

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
刚开始接触ELISA还是严格按说明书操作为好，至于LZ不明白说明书上的用语可在此发问或去丁香园发问也行！祝你实验成功！
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5楼2010-12-06 09:36:46
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yaojc

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by guoxingjun2008 at 2010-12-03 11:14:40:



对了，我这个试剂盒是把样品和酶液都加完后，37°温育1小时，然后再洗板3-5次，之后就是加底物和终止液。而有很多试剂盒都是加完样品，洗板3次，然后加酶液后又洗板3次。
  这个加样完毕后的总洗板和分别加 ...

一步法和两部法的区别，严格按照说明书进行操作，如果没有目标物质，那吸光度值基本和空白孔接近，应该不过CO值的。
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专注、专心、专业
6楼2010-12-06 15:26:23
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guoxingjun2008

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by yaojc at 2010-12-06 15:26:23:

一步法和两部法的区别，严格按照说明书进行操作，如果没有目标物质，那吸光度值基本和空白孔接近，应该不过CO值的。

谢谢您的热情回答
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7楼2010-12-07 11:24:52
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