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【求助/交流】大肠杆菌越摇越清,怎么回事
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yangjunzju
木虫
(正式写手)
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(幼儿园)
金币: 1546.3
帖子: 780
在线: 266.7小时
虫号: 827275
[交流]
【求助/交流】大肠杆菌越摇越清,怎么回事
如题,最近我摇了几瓶大肠杆菌(重组菌,AMP抗性),OD600 nm能长到0.5,加入诱导剂后(两种质粒,分别用IPTG和阿拉伯糖诱导),发现半小时左右菌液开始变澄清,最后变成接近培养基颜色,里面有一些絮状物的沉淀,不知道是不是菌体死亡的残骸,但是继续培养(过夜,>8h)又能长出来。。。继续变混浊。。。这是什么原因呢,我百思不得其解。。还请各位指点!!非常感谢~
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2010-11-30 11:06:55
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安安227
铁虫
(初入文坛)
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虫号: 1759261
引用回帖:
407912楼
:
Originally posted by
silicare
at 2010-11-30 13:30:39:
还有一个可能就是毒蛋白的表达,这和你的IPTG加入正好符合
加入后毒蛋白表达,导致细胞死亡或活力下降,等iptg消耗降解了,或者一些不表达蛋白的菌长起来,有重新浑浊了
没看到具体情况,只能推测
iptg不参与代谢
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13楼
2012-05-16 00:37:00
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leiyinwill
银虫
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虫号: 1101734
★
yangjunzju(金币
+1
):谢谢参与
前一段时间我就出现过类似的问题,师兄给我分析可能是因为染菌了。我就重新划线,挑单克隆培养,最后扩大培养,每一步严格无菌操作,现在问题解决了。
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2楼
2010-11-30 12:05:34
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skkyy88888
铜虫
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虫号: 277762
★
yangjunzju(金币
+1
):谢谢参与
重新做吧。严格把关。
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3楼
2010-11-30 12:09:00
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空谷幽风
金虫
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★
yangjunzju(金币
+1
):谢谢参与
又没有可能受到噬菌体污染?
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5楼
2010-11-30 12:26:53
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