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janny22092金虫 (正式写手)
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【求助】紫外分光测吸光度不稳定 已有5人参与
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蜜的脱色实验，在测定其吸光度的时候，变数较大。不同的时间测出来的吸光度数据不一样，不知道是什么因素影响的。 还有一个问题，就是空白实验做对比的时候，是用原始的稀释倍数相同的糖蜜呢，还是不加脱色剂而其他的处理步骤都要走一遍之后所得到的糖蜜。 注：糖蜜本身静置一段时间会出现沉淀，离心也会有沉淀，还有，不加脱色剂只是在一定条件下离心后 其吸光度也会变化很多，只是没有加脱色剂之后的明显而已 [ Last edited by lovibond on 2011-11-27 at 19:59 ] |
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lovibond(金币+1):感谢专家耐心解答 2010-11-25 17:17:35
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首先，紫外分光光度法测数据本身就很不稳定，受影响比较大。 其次，蜜的脱色程度决定了里面所含影响物质的多少，色素的影响肯定明显的，所以你说不同的时间测出来的数据不同，那是必然的，就是相同时间所测数据也应有波动，因为脱色的方式肯定对其也有影响，充分脱色与未充分脱色对紫外分光比色也是有影响的。 再有就是你说的空白比对，我不明白是什么意思。 |
a4799679582楼2010-11-25 16:55:43
janny22092
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3楼2010-11-26 08:30:48
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4楼2010-11-26 08:37:52
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5楼2010-11-26 09:50:24
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我认为你应该稀释，离心过滤之后做空白参比 因为离心过滤是物理因素的影响，并不是脱色剂的影响，既然你是比较脱色效果的 所以其它的物理影响因素应该一致 因为你自己也说糖蜜本身就会沉淀的，你脱色之后的样品离心沉淀并不是脱色剂处理的效果啊，是物理因素迫使其澄清的，所以我建议你用相同处理的糖蜜做空白，只是不要加脱色剂就好了。 你认为呢？ 这个你可以在你的实验论文中写明条件的，即使答辩老师问起来，你也能明确回答他们。 呵呵，希望能对你有所帮助。 |
6楼2010-11-26 10:20:10
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空白应按6楼所述去做，因为所谓空白试验指在不加供试品处理的情况下,按同法操作所得的结果，这样才能尽量排除操作过程对试验效果的影响。 影响紫外吸收的因素： 吸光度值小数点后第三位一般允许正负5个数的偏差，但不同规格、档次的仪器稳定性不同，可以把参比池和检测池都放空白液，看吸光度值随时间的变化，至少记录半天，每半小时记录一次，学校一般都是进口设备，可能比较稳定； 大部分种类的“颜色”是一种容易损失的成分，受氧直接影响而出现损失，并且一般都随光照和升温加速； 与时间也成正相关，你把它常温、常压、光照放半月以上，不用离心和加脱色剂，它也就变浅甚至无色了； 如你所说，蜜沉淀过程就是一个受时间影响的脱色过程，吸光度随时间不同，当然会不同，问题你都发现了，可能主要需要联系起来。 如果算上仪器误差，你的脱色剂好像不怎么起作用，坦白的说。  |
7楼2010-11-26 11:29:40
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