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janny22092

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助】紫外分光测吸光度不稳定 已有5人参与

蜜的脱色实验,在测定其吸光度的时候,变数较大。不同的时间测出来的吸光度数据不一样,不知道是什么因素影响的。
    还有一个问题,就是空白实验做对比的时候,是用原始的稀释倍数相同的糖蜜呢,还是不加脱色剂而其他的处理步骤都要走一遍之后所得到的糖蜜。
    注:糖蜜本身静置一段时间会出现沉淀,离心也会有沉淀,还有,不加脱色剂只是在一定条件下离心后 其吸光度也会变化很多,只是没有加脱色剂之后的明显而已

[ Last edited by lovibond on 2011-11-27 at 19:59 ]
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红景天水

木虫 (正式写手)

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lovibond(金币+1):感谢专家耐心解答 2010-11-25 17:17:35
首先,紫外分光光度法测数据本身就很不稳定,受影响比较大。
其次,蜜的脱色程度决定了里面所含影响物质的多少,色素的影响肯定明显的,所以你说不同的时间测出来的数据不同,那是必然的,就是相同时间所测数据也应有波动,因为脱色的方式肯定对其也有影响,充分脱色与未充分脱色对紫外分光比色也是有影响的。
再有就是你说的空白比对,我不明白是什么意思。

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2楼2010-11-25 16:55:43
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janny22092

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 红景天水 at 2010-11-25 16:55:43:
首先,紫外分光光度法测数据本身就很不稳定,受影响比较大。
其次,蜜的脱色程度决定了里面所含影响物质的多少,色素的影响肯定明显的,所以你说不同的时间测出来的数据不同,那是必然的,就是相同时间所测数据也 ...

我说的空白对比是这样的,一个是稀释的倍数相同,不加脱色剂,根其他的脱色样品一样先进行搅拌,然后过滤或者离心,再用来作为空白的参比,再一个是只稀释相同的倍数,不搅拌不离心过滤等就用来作为空白的参比液。
    这两个空白我不知道该选用哪一个更合适。谢谢
3楼2010-11-26 08:30:48
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红景天水

木虫 (正式写手)


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引用回帖:
Originally posted by janny22092 at 2010-11-26 08:30:48:

我说的空白对比是这样的,一个是稀释的倍数相同,不加脱色剂,根其他的脱色样品一样先进行搅拌,然后过滤或者离心,再用来作为空白的参比,再一个是只稀释相同的倍数,不搅拌不离心过滤等就用来作为空白的参比液 ...

你这个实验是比较脱色效果??
你这样做出来的数值是正的还是负的??
4楼2010-11-26 08:37:52
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janny22092

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 红景天水 at 2010-11-26 08:37:52:

你这个实验是比较脱色效果??
你这样做出来的数值是正的还是负的??

这个实验就是看脱色效果的,如果用未处理的稀释液作参比的话,脱色率是百分之好几十,如果用离心过滤之后的稀释液作参比的话脱色率大部分时候是正的,就是百分之几的数值,偶尔会出现负值。
5楼2010-11-26 09:50:24
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红景天水

木虫 (正式写手)

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树树8013(金币+2):谢谢专家顾问的耐心精彩解答 2010-11-26 11:56:47
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Originally posted by janny22092 at 2010-11-26 09:50:24:

这个实验就是看脱色效果的,如果用未处理的稀释液作参比的话,脱色率是百分之好几十,如果用离心过滤之后的稀释液作参比的话脱色率大部分时候是正的,就是百分之几的数值,偶尔会出现负值。

我认为你应该稀释,离心过滤之后做空白参比
因为离心过滤是物理因素的影响,并不是脱色剂的影响,既然你是比较脱色效果的
所以其它的物理影响因素应该一致
因为你自己也说糖蜜本身就会沉淀的,你脱色之后的样品离心沉淀并不是脱色剂处理的效果啊,是物理因素迫使其澄清的,所以我建议你用相同处理的糖蜜做空白,只是不要加脱色剂就好了。
你认为呢?
这个你可以在你的实验论文中写明条件的,即使答辩老师问起来,你也能明确回答他们。
呵呵,希望能对你有所帮助。
6楼2010-11-26 10:20:10
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咱家老四

木虫 (著名写手)

浊世俗人痴事妄言

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树树8013(金币+2):谢谢你的耐心精彩解答 2010-11-26 11:53:39
空白应按6楼所述去做,因为所谓空白试验指在不加供试品处理的情况下,按同法操作所得的结果,这样才能尽量排除操作过程对试验效果的影响。
影响紫外吸收的因素:
吸光度值小数点后第三位一般允许正负5个数的偏差,但不同规格、档次的仪器稳定性不同,可以把参比池和检测池都放空白液,看吸光度值随时间的变化,至少记录半天,每半小时记录一次,学校一般都是进口设备,可能比较稳定;
大部分种类的“颜色”是一种容易损失的成分,受氧直接影响而出现损失,并且一般都随光照和升温加速;
与时间也成正相关,你把它常温、常压、光照放半月以上,不用离心和加脱色剂,它也就变浅甚至无色了;
如你所说,蜜沉淀过程就是一个受时间影响的脱色过程,吸光度随时间不同,当然会不同,问题你都发现了,可能主要需要联系起来。
如果算上仪器误差,你的脱色剂好像不怎么起作用,坦白的说。
垂肩负手,渐行渐远
7楼2010-11-26 11:29:40
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janny22092

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 红景天水 at 2010-11-26 08:37:52:

你这个实验是比较脱色效果??
你这样做出来的数值是正的还是负的??

你好,想请教一下,最近做的脱色率大部分是负值,不知道是什么原因导致的,操作步骤,还有处理方法全部都是相同的,以前很少出现这种情况,这几天几乎都是这样,所做的空白对比就是不加脱色剂,其它的物理处理方法完全一样。
8楼2010-12-10 09:58:03
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红景天水

木虫 (正式写手)


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Originally posted by janny22092 at 2010-12-10 09:58:03:

你好,想请教一下,最近做的脱色率大部分是负值,不知道是什么原因导致的,操作步骤,还有处理方法全部都是相同的,以前很少出现这种情况,这几天几乎都是这样,所做的空白对比就是不加脱色剂,其它的物理处理方 ...

这我也就不太明白了
其实吧,一开始我就认为你这个应该是负值。
你出现正值我还觉得奇怪
9楼2010-12-10 16:41:12
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janny22092

金虫 (正式写手)


lovibond(金币+1):鼓励好学的同学 2010-12-12 21:06:20
引用回帖:
Originally posted by 红景天水 at 2010-12-10 16:41:12:



这我也就不太明白了
其实吧,一开始我就认为你这个应该是负值。
你出现正值我还觉得奇怪

加了活性炭脱色之后为什么就变负值了呢,是因为分离不彻底还是什么原因。但是在做最佳稀释比例的时候,也不全是负值,做了四个比例,有一个是正值的,总之就是吸光度不稳,一会一个值,很郁闷!
10楼2010-12-11 09:16:44
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