应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】求如何用96孔板做抗菌实验及数据处理问题
71/1返回列表
查看: 3556  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

晴天8773

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】求如何用96孔板做抗菌实验及数据处理问题

求助各位大侠如何用96孔板做抗菌实验？所得数据如何处理？
本人做法：
1，将0.5浊度的菌悬液，经灭菌的液体培养基1∶1000稀释后，向每孔中加100μl。
2，将倍比稀释后不同浓度的抗菌药物溶液分别加到灭菌的孔板中，第3至第10孔加药液，每孔100μl，其余各列加入相同体积的液体培养基，作为生长对照。酶标仪读数。
3，过夜培养，酶标仪读数。
现在不知道数据怎么处理，也不知道做法是否正确？
请各位大侠赐教。
本人化工专业，对生物一窍不通，求助了，谢谢各位。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2010-11-21 22:40:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
dhd997(金币+2):谢谢交流，还没申请啊？ 2010-11-22 08:29:29
晴天8773(金币+9):谢谢。考虑了孔板的边缘效应，所以每列8个孔加的是相同的浓度，求出每列的均值之后，不知道怎么继续处理了？抗菌率是实验组的均值比上对照组的均值吗？ 2010-11-22 08:51:05
复孔3~5个，求均值
先后重复三次实验，同样得均值
将3次均值再求均值及标准差
方差分析，根据需要作比较

“生长对照”加的是药液的溶剂
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-11-21 23:55:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晴天8773

银虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-11-21 23:55:41:
复孔3~5个，求均值
先后重复三次实验，同样得均值
将3次均值再求均值及标准差
方差分析，根据需要作比较

“生长对照”加的是药液的溶剂

标准差及方差的数值代表什么意思？
加入材料为金黄色。经过灭菌的液体培养基稀释后不同浓度的材料颜色不同，吸光度不同，差别较大。
过夜培养后，每列的吸光度差别变小。
左边六列数据如下：
（一）加入菌悬液、材料测定吸光度（原始数据）：
   1菌悬液 2菌悬液        3材料原液        4稀释2倍        5稀释4倍        6稀释8倍
A   0.298        0.296        0.574        0.462        0.396        0.372
B   0.307        0.295        0.714        0.564        0.503        0.436
C   0.310        0.309        0.542        0.528        0.443        0.413
D   0.301        0.304        0.654        0.559        0.498        0.453
E   0.298        0.296        0.574        0.462        0.396        0.372
F   0.307        0.295        0.714        0.564        0.503        0.436
G   0.310        0.309        0.542        0.528        0.443        0.413
H   0.301        0.304        0.654        0.559        0.498        0.453
（二）过夜培养之后测定吸光度（十二小时）：
   1菌悬液         2菌悬液        3材料原液        4稀释2倍        5稀释4倍        6稀释8倍
A   0.987         0.815        1.064        0.938        0.806        0.738
B   0.984         1.001        1.071        0.939        0.759        0.712
C   1.014         1.035        1.010        0.946        0.828        0.751
D   1.003         1.058        1.129        0.964        0.828        0.750
E   0.991         0.812        1.073        0.947        0.809        0.736
F   0.983         1.008        1.050        0.945        0.775        0.715
G   1.013         1.040        1.019        0.965        0.836        0.759
培养18小时、24小时后分别测定吸光度。
请教大侠，我怎么通过上面的数据求出抗菌率？
赞一下 回复此楼
3楼2010-11-22 09:13:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
lstt09nk(金币+2):鼓励交流~ 2010-11-22 11:21:10
晴天8773(金币+8):大侠，能具体说说吗?我的材料是非常均匀的液体，八千转离心不沉淀。大肠杆菌没有离心过，不知道离心时转速在怎么控制，离心后菌群如何收集，请赐教。在线等，谢谢。 2010-11-22 14:42:58
我们暂时抛开什么统计方法不说
首先你的药对吸光度影响就很大了，所以很难下结论了。
你得重新优化你的实验方法，比如测之前离心，收集菌体，去掉培养液，重新加培养基测吸光度
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-11-22 11:15:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★ ★ ★
lstt09nk(金币+5):辛苦~ 2010-11-22 17:09:17
晴天8773(金币+8):谢谢，那我还是用培养皿做吧，就是实验的准确度不高。 2010-11-22 18:31:29
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-11-22 11:15:58:
能具体说说吗?我的材料是非常均匀的液体，八千转离心不沉淀。大肠杆菌没有离心过，不知道离心时转速在怎么控制，离心后菌群如何收集，请赐教。在线等，谢谢。 2010-11-22 14:42:58

材料就算是均匀的液体，也有可能影响吸光度。比浊法一般在OD600那里做吧
你可以看到，在初始时间点，加了材料的原液和稀释液之后，吸光度上升了接近50%，就说明这个材料以及稀释液会对吸光度有很大的影响了。而且不同的稀释倍数，对于吸光度的影响还不一致，这就很难通过扣除的方法来做。除非你用双波长来矫正，不知道能不能有什么改善。

大肠杆菌离心的话，可以试试8000*g~10000*g，弃包含材料的培养基，然后再用等量的培养基重悬均匀去测吸光度

有那种专门的板式离心机的
没有的话就辛苦你一个孔一个孔吸出来做了………………
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2010-11-22 17:08:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

郑江松

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
我也是最近在做这方面的试验啊，没有师兄，全是一人看文献走过来的，你的方法我都用来，多看看文献吧。吸光度是解决不了问题的，样品是有颜色的。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2011-10-21 19:51:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lancylxi

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-11-22 17:08:31
材料就算是均匀的液体，也有可能影响吸光度。比浊法一般在OD600那里做吧
你可以看到，在初始时间点，加了材料的原液和稀释液之后，吸光度上升了接近50%，就说明这个材料以及稀释液会对吸光度有很大的影响了。而 ...

如果是这样的情况，他可以不可以考虑····先用小试管培养，完了到点了以后一起离心，倒掉含药培养基，加入无药培养基后，吸取200ul菌悬液加到96孔板里面去，然后加入相关试剂反应后，测OD
赞一下 回复此楼
7楼2018-08-16 11:06:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 晴天8773 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 304求调剂 +8 小熊joy 2026-03-14 8/400 2026-03-17 17:29 by ruiyingmiao
[硕博家园] 湖北工业大学 生命科学与健康学院-课题组招收2026级食品/生物方向硕士 +3 1喜春8 2026-03-17 5/250 2026-03-17 17:18 by ber川cool子
[基金申请] 被我言中：新模板不强调格式了，假专家开始管格式了 +3 beefly 2026-03-14 3/150 2026-03-17 16:45 by RRRKKK
[考研] 085600材料与化工 +4 安全上岸！ 2026-03-16 4/200 2026-03-17 14:02 by 勇敢太监王公公
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +4 梨花珞晚风 2026-03-17 4/200 2026-03-17 13:38 by houyaoxu
[考研] 材料工程专硕274一志愿211求调剂 +6 薛云鹏 2026-03-15 6/300 2026-03-17 11:05 by 学员h26Tkc
[考研] 285化工学硕求调剂（081700） +9 柴郡猫_ 2026-03-12 9/450 2026-03-17 10:18 by Sammy2
[考研] 274求调剂 +5 时间点 2026-03-13 5/250 2026-03-17 07:34 by 热情沙漠
[考研] 化学调剂0703 +8 啊我我的 2026-03-11 8/400 2026-03-16 17:23 by 我的船我的海
[考研] 0703一志愿211 285分求调剂 +5 ly3471z 2026-03-13 5/250 2026-03-16 16:16 by 哦哦123
[考研] 0703化学调剂，求各位老师收留 +8 秋有木北 2026-03-14 8/400 2026-03-16 15:21 by 哦哦123
[考研] 277材料科学与工程080500求调剂 +3 自由煎饼果子 2026-03-16 3/150 2026-03-16 14:10 by 运气yunqi
[考研] 求老师收留调剂 +4 jiang姜66 2026-03-14 5/250 2026-03-15 20:11 by Winj1e
[考研] 255求调剂 +3 李嘉慧， 2026-03-12 4/200 2026-03-14 16:58 by 有只狸奴
[考研] 材料专硕288分求调剂 一志愿211 +4 在家想你 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:49 by JourneyLucky
[考研] 332求调剂 +3 zjy101327 2026-03-11 6/300 2026-03-13 22:48 by JourneyLucky
[考研] 求材料调剂 085600英一数二总分302 前三科235 精通机器学习 一志愿哈工大 +4 林yaxin 2026-03-12 4/200 2026-03-13 22:04 by 星空星月
[考研] 材料专硕350 求调剂 +4 王金科 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:02 by ruiyingmiao
[考研] 307求调剂 +5 超级伊昂大王 2026-03-12 5/250 2026-03-13 15:56 by 棒棒球手
[考研] 大连大学化学专业研究生调剂 +3 琪久. 2026-03-10 8/400 2026-03-11 10:02 by 琪久.
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭