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【求助/交流】RNA中有没有DNA污染能通过电泳图看吗?
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lianyi1989
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[交流]
【求助/交流】RNA中有没有DNA污染能通过电泳图看吗?
怎样判断rna中有没有dna污染,通过电泳图可以看吗?怎么看?请高手指教一下~
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2010-11-21 21:44:01
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phyllislhy
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一般用DNase处理过的RNA和未处理过的RNA进行PCR,用保守引物扩增,DNA为对照,细菌用16S保守区,植物用actin或tubuline保守区扩一下,看电泳图的时候多调整一下亮度对比度什么的,如果有DNA污染就能看到了
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11楼
2010-11-24 15:45:42
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dhd997(金币+1):谢谢交流 2010-11-22 08:30:47
lianyi1989(金币+1): 2010-11-24 12:55:53
当然可以了,基因组一般比较大,胶中的位置大约在胶空附近。而RNA基本上是三条带。位置大约在300-2000bp左右
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2楼
2010-11-21 23:19:43
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boouy
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dhd997(金币+1):谢谢交流 2010-11-22 08:31:05
lianyi1989(金币+1): 2010-11-24 12:55:59
电泳看得见已经是很明显了,痕量污染可以用PCR检测。
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2010-11-21 23:46:41
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amilie030312
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★
lstt09nk(金币+1):很热心,很积极,生物版欢迎你 2010-11-22 10:54:32
lianyi1989(金币+1): 2010-11-24 12:56:03
有些比较微量的残留是电泳看不出来的吧,但是PCR一放大肯定就能看出来了,所以最简单的办法是直接用抽提出来的RNA跑PCR看是否有条带出来,如果出来了就说明有污染啦。
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4楼
2010-11-22 10:05:37
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