| 查看: 2985 | 回复: 12 | |||
chendarid0银虫 (初入文坛)
|
[交流]
【求助/交流】关于荧光定量PCR中cdna合成的问题 已有7人参与
|
|
各位高手请指点啊 ，小弟在此谢过了 我是做荧光定量pcr的 在其上游步骤cdna合成中 我用primescript 1st strand cdna synthesis kit 时得到的cdna用内参引物β-actin进行半定量pcr鉴定结果发现目的条带比较淡，但无其他杂带。但是我用他们公司推荐的专门用于荧光定量pcr的可以去除基因组dna污染的试剂盒primescript RT reagent kit with gDNA eraser时可以得到目的条带比较亮，但是却有小于100bp的引物二聚体，呈弥散雾状分布在下方，听师姐说cdna合成后是需要基因组dna的去除的，请问各位高手这是怎么回事 谢谢 |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有192人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有3人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 荧光定量PCR cDNA怎么定量啊？
已经有12人回复
- 小白请问，cDNA第一条链合成后如何做PCR了？
已经有5人回复
- 反转录
已经有16人回复
- 想问下在以cDNA为模板时，PCR的结果却是徒步 什么原因
已经有5人回复
- 【求助/交流】qRT-PCR疑问
已经有5人回复
- 【求助/交流】从RNA到cDNA合成再到克隆PCR的实验技巧和操作细节问题若干，寻求解答
已经有12人回复
- 【专题】PCR实验技术指南
已经有535人回复
- RT-PCR后的cDNA呢？
已经有17人回复
chendarid0
银虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 424.5
- 散金: 5
- 帖子: 50
- 在线: 32.4小时
- 虫号: 1057694
- 注册: 2010-07-14
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
2楼2010-11-02 08:59:13
taigongzaici
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 325.7
- 散金: 12
- 红花: 1
- 帖子: 157
- 在线: 19.1小时
- 虫号: 1115977
- 注册: 2010-10-07
- 专业: 水产生物遗传育种学
3楼2010-11-02 09:36:04
silicare
荣誉版主 (文坛精英)
合伙创业版兼职版主
- MolEPI: 1
- 应助: 88 (初中生)
- 贵宾: 29.823
- 金币: 18946.3
- 散金: 24272
- 红花: 300
- 沙发: 88
- 帖子: 10222
- 在线: 1602.6小时
- 虫号: 948825
- 注册: 2010-01-26
- 专业: 摩尼教
- 管辖: 新药研发
4楼2010-11-02 12:36:49
chendarid0
银虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 424.5
- 散金: 5
- 帖子: 50
- 在线: 32.4小时
- 虫号: 1057694
- 注册: 2010-07-14
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
5楼2010-11-03 09:59:02
6楼2010-11-04 09:38:06
zhwenxing
木虫 (著名写手)
尛森蟲
- 应助: 11 (小学生)
- 贵宾: 0.005
- 金币: 2189.8
- 散金: 50
- 红花: 2
- 帖子: 1324
- 在线: 93.3小时
- 虫号: 596551
- 注册: 2008-09-09
- 专业: 疫苗学
7楼2010-11-04 11:19:06
chendarid0
银虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 424.5
- 散金: 5
- 帖子: 50
- 在线: 32.4小时
- 虫号: 1057694
- 注册: 2010-07-14
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
我有这试剂盒 但有问题
|
我有这种可以去除基因组DNA的primerscript RT reagent kit with gDNA eraser(perfect real time)的专门为荧光定量的试剂盒，可是得到的CDNA进行以内参基因β-actin为引物pcr扩增时出现非特异性扩增。以前用那种不含基因组DNA去除的普通试剂盒primerscript 1st strand cdna synthesis kit 时反而没有非特异性扩增，这是怎么回事呢？ 我是想用去除基因组DNA的primerscript RT reagent kit with gDNA eraser(perfect real time)的专门为荧光定量的试剂盒，怎样才能避免非特异性扩增呢？ 非特异性扩增一般在目的条带下面呈雾状团簇状分布，有点像云朵，也有小于100bp的引物二聚体。 请各位高手指点一二，小弟不胜感激! |
8楼2010-11-05 09:51:02
chendarid0
银虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 424.5
- 散金: 5
- 帖子: 50
- 在线: 32.4小时
- 虫号: 1057694
- 注册: 2010-07-14
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
9楼2010-11-05 09:52:21
chendarid0
银虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 424.5
- 散金: 5
- 帖子: 50
- 在线: 32.4小时
- 虫号: 1057694
- 注册: 2010-07-14
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
10楼2010-11-05 09:53:35
