| 查看: 4585 | 回复: 13 | |||
gn2003_0金虫 (小有名气)
|
[交流]
【求助/交流】求助高手-棉花中RNA提取质量验证及反转后cDNA质量验证问题 已有3人参与
|
我用试剂盒提取棉花RNA，由于新手有相关问题请教，首先是棉花RNA电泳后是不是应该有两条带，而我提取的RNA电泳图片如下（去离子甲酰胺变性，1.2%凝胶电泳） 定量后OD260/280=1.9-2.2之间，当时就做了反转。随后放置一周左右进行电泳验证，结果如下，泳道左侧八个为cDNA质量验证结果，有弥散的条带但是很弱，是不是CDNA质量不行，或者就是当初RNA提取的质量就不好不适合反转呢。 另外下面片子的右侧四个亮的泳道是我放置一周后的RNA质量，结果直接分不开带（我是没有变性直接跑的电泳）  [ Last edited by gn2003_0 on 2010-10-27 at 21:15 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
氢氧化钾活化操作
已经有19人回复
-
散金
已经有68人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有271人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
-
ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析
已经有0人回复
-
AM630（CAS 164178-33-0）：CB2 选择性配体的实验使用与供应要点
已经有0人回复
-
ADC标杆分子T-DM1全解析：从结构设计到实验室应用的技术要点
已经有0人回复
-
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？
已经有0人回复
-
His标签蛋白纯化怎么才能快？
已经有0人回复
-
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 提取的RNA暂时不用存放在多少度不会影响其质量啊
已经有18人回复
- 请问血清RNA怎样提取？又怎样验证已提取出血清RNA？
已经有19人回复
- 关于RNA以及cDNA电泳问题，拜求各位大侠指点
已经有10人回复
- 酵母质粒转化及提取验证问题求助
已经有12人回复
- 【求助/交流】水稻叶片RNA提取问题
已经有15人回复
- 【求助/交流】关于提取RNA所用枪头的处理问题
已经有26人回复
- 【求助/交流】如果提RNA的样品（叶片）有点降解，如何补救（尽量可以反转出CDNA）？
已经有5人回复
- 【求助/交流】异硫氰酸胍法提取植物RNA中DNA残留问题~回帖就送币！！！
已经有14人回复
- 【求助/交流】如何检测cDNA的质量
已经有5人回复
- 【求助/交流】关于RNA提取后DNaseⅠ的处理
已经有11人回复
- 【求助/交流】RNA的提取问题和qRT-PCR分析基因在不同时间的定量表达
已经有10人回复
- 【求助/交流】从RNA到cDNA合成再到克隆PCR的实验技巧和操作细节问题若干，寻求解答
已经有12人回复
gn2003_0
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 742.1
- 散金: 10
- 帖子: 216
- 在线: 12.5小时
- 虫号: 796263
- 注册: 2009-06-17
- 性别: GG
- 专业: 细胞生物学
2楼2010-10-27 21:37:00
3楼2010-10-27 22:40:10
won7
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 954
- 散金: 55
- 帖子: 297
- 在线: 61.2小时
- 虫号: 19911
- 注册: 2003-07-30
- 性别: GG
- 专业: 水产资源与保护学
4楼2010-10-27 22:45:48
jackiechubut
木虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1748.8
- 散金: 5
- 帖子: 61
- 在线: 18.5小时
- 虫号: 1088897
- 注册: 2010-09-04
- 性别: GG
- 专业: 植物遗传学
5楼2010-10-28 00:47:08
gn2003_0
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 742.1
- 散金: 10
- 帖子: 216
- 在线: 12.5小时
- 虫号: 796263
- 注册: 2009-06-17
- 性别: GG
- 专业: 细胞生物学
6楼2010-10-28 09:52:49
walker2898
银虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 455.5
- 散金: 1
- 帖子: 178
- 在线: 25.2小时
- 虫号: 599350
- 注册: 2008-09-11
- 专业: 作物种质资源与遗传育种学
7楼2010-10-28 09:57:57
jhu132llh
荣誉版主 (知名作家)
大洪
- MolEPI: 14
- 应助: 63 (初中生)
- 贵宾: 1.07
- 金币: 11622.1
- 散金: 796
- 红花: 30
- 沙发: 1
- 帖子: 5128
- 在线: 317小时
- 虫号: 1095066
- 注册: 2010-09-10
- 性别: GG
- 专业: 生殖生物学
- 管辖: 动植物
★ ★ ★
silicare(金币+3):很详细 2010-10-28 11:55:06
gn2003_0(金币+6):你回答的很详细 多谢了 2010-10-30 10:18:46
silicare(金币+3):很详细 2010-10-28 11:55:06
gn2003_0(金币+6):你回答的很详细 多谢了 2010-10-30 10:18:46
|
一，RNA电泳时会出现3条带的，不用跑变性胶也行的，我们的RNA就跑正常琼脂糖胶也结果很好的。 二，你的OD值表明你的RNA质量还是可以的，应该不会出现RNA的问题。 三，反转后的电泳DNA弥散而且很不清楚，可能的原因有：从点样到开始跑胶的时间过长DNA弥散了；反转的时候出错了；第二种可能性大。 四，RNA就算在-80度都会降解的，所以如果是在-20度放置一周可能RNA会降解的。 五，个人觉得如果你的RNA是一直在-80度保存的话就再好好做一次反转。 |
8楼2010-10-28 10:37:33
9楼2010-10-28 12:11:04
gn2003_0
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 742.1
- 散金: 10
- 帖子: 216
- 在线: 12.5小时
- 虫号: 796263
- 注册: 2009-06-17
- 性别: GG
- 专业: 细胞生物学
10楼2010-10-30 10:21:08
10