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jerrymaster

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】RACE引物设计的要求 已有3人参与

本人接下来需要做RACE,两端都需要做,但是特异性引物的设计还有些模糊,是不是和普通引物一样设计呢?是不是需要先设计3端的特异引物,然后根据3端扩增结果再设计5端特异引物?希望各位学长能给指点下哈···
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wshyann

新虫 (初入文坛)

RACE引物设计的要求

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-10-25 18:13:06
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-10-25 18:13:12
silicare(金币+3):处女帖,奖励太少了 2010-10-26 09:42:34
跟普通引物一样设计吧,可以先在3’设计一个上游引物,在5’设计一个下游引物,分别做3’RACE和5’RACE,也可以分别设计两个,做半巢式PCR
2楼2010-10-25 15:47:02
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ben1147

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-10-25 18:13:13
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-10-25 18:13:19
可以分别做,互不影响
不过这样需要有一段已知序列,最后是这段已知序列、3' RACE结果和5'RACE结果三段拼起来得到全场
3楼2010-10-25 18:08:03
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jerrymaster

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by wshyann at 2010-10-25 15:47:02:
跟普通引物一样设计吧,可以先在3’设计一个上游引物,在5’设计一个下游引物,分别做3’RACE和5’RACE,也可以分别设计两个,做半巢式PCR

哈,谢谢·····
4楼2010-10-25 18:09:52
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jerrymaster

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by ben1147 at 2010-10-25 18:08:03:
可以分别做,互不影响
不过这样需要有一段已知序列,最后是这段已知序列、3' RACE结果和5'RACE结果三段拼起来得到全场

对啊哈  5'RACE的特异性引物是不是一定要3' RACE结束后根据其结果来设计呢?谢谢哈
5楼2010-10-25 18:12:26
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ben1147

木虫 (正式写手)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by jerrymaster at 2010-10-25 18:12:26:

对啊哈  5'RACE的特异性引物是不是一定要3' RACE结束后根据其结果来设计呢?谢谢哈

不用啊
5‘和3’RACE结果不一定非要相互重叠,只要都能和已知序列重叠上就行了呗
6楼2010-10-25 21:04:59
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jerrymaster

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by ben1147 at 2010-10-25 21:04:59:

不用啊
5‘和3’RACE结果不一定非要相互重叠,只要都能和已知序列重叠上就行了呗

哈哈  谢谢这位学长·····知道了
7楼2010-10-26 09:04:08
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